| 大豆豆荚特异性启动子的克隆及功能分析 |
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| 引用本文： | 宋 阳,王丕武,张学明,等.大豆豆荚特异性启动子的克隆及功能分析[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2014,42(10):63-69,80. |
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| 作者姓名： | 宋 阳 王丕武 张学明 等 |
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| 作者单位： | 吉林农业大学 农学院;吉林农业大学 农学院;吉林农业大学 农学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30971805)；转基因生物新品种培育重大专项（2011ZX08004-004） |
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| 摘 要： | 【目的】克隆大豆豆荚特异性启动子,并对其进行功能分析,为研究抗病虫基因在大豆荚中的特异性表达奠定基础。【方法】利用PCR技术克隆得到豆荚特异性启动子(Pod Specific Promoter,PSP)的核心序列,用PSP序列取代质粒pBI121中的CaMV 35S启动子,构建与GUS基因融合的豆荚特异性报告载体pPSP-GUS,通过农杆菌介导法转化烟草"NC89",对转基因植株进行分子生物学检测,将鉴定为阳性的植株经GUS组织化学染色,验证PSP片段的功能。【结果】所获得的豆荚特异性启动子PSP大小为1 270bp,与已报道序列的同源性为98%,具有多种典型的启动子表达调控元件,如A/T-rich core、CAATBOX、TATABOX、GATABOX等。将pPSP-GUS质粒转化烟草后,经PCR和Southern blot检测结果显示,成功获得了转基因阳性烟草植株。GUS活性检测结果显示,在转pPSPGUS质粒的烟草根和叶片中均未检测到GUS活性,在萼片中可检测到低水平的GUS活性;而在花荚中可检测到高水平的GUS活性,且明显高于转pBI121质粒的对照植株。【结论】克隆得到的豆荚特异性启动子PSP片段具有启动基因在豆荚中特异性表达的功能。
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| 关 键 词： | 大豆 豆荚特异性启动子 序列分析 烟草 GUS染色 |
| 收稿时间： | 7/8/2013 12:00:00 AM |
Cloning and functional analysis of soybean pod specific promoter |
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| SONG Yang,WANG Pi-wu and ZHANG Xue-ming,et al.Cloning and functional analysis of soybean pod specific promoter[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2014,42(10):63-69,80. |
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| Authors: | SONG Yang WANG Pi-wu and ZHANG Xue-ming |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | soybean pod specific promoter sequence analysis tobacco GUS staining |
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