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玉米颗粒结合型淀粉合成酶(GBSS )基因cDNA的克隆及植物表达载体的构建
引用本文:乔光明,张明浩,李忠诚,陈正华. 玉米颗粒结合型淀粉合成酶(GBSS )基因cDNA的克隆及植物表达载体的构建[J]. 农业生物技术学报, 2007, 15(4): 673-676
作者姓名:乔光明  张明浩  李忠诚  陈正华
作者单位:1. 西南科技大学生命科学与工程学院,绵阳,621010
2. 东南大学生物科学与医学工程学院,南京,210096
3. 甘肃亚盛集团博士后科研工作站北京分站,北京,100101
摘    要:根据已发表的玉米颗粒结合型淀粉合成酶GBSS(granule-bound starch synthase)基因序列,设计两对引物,其中一对为定点突变的过度引物。从授粉后15d的玉米胚乳中提取总RNA,以反转录合成的cDNA第一链为模板,首次用定点突变、RT-PCR、融合PCR的方法克隆了GBSS 基因的全长cDNA(1818bp)片段。序列测定表明,该片段与文献报道的序列具有99.72%的同源性。并构建了以胚乳特异表达性的Gt1为启动子,以NOS-ter为终止子的植物表达载体pBI-Gt1-GBSS,其含有NPT‖选择标记基因。以期实现特定时期GBSS基因在玉米胚乳中的大量表达。

关 键 词:颗粒结合型淀粉合成酶  基因克隆  定点突变  融合PCR  植物表达载体
文章编号:1006-1304(2007)04-0673-04
收稿时间:2006-11-20
修稿时间:2007-02-20

cDNA Cloning of Maize Granule-bound Starch Synthase Gene and Construction of Plant Expressing Vector
QIAO Guang-ming,ZHANG Ming-hao,LI Zhong-cheng,CHEN Zheng-hua. cDNA Cloning of Maize Granule-bound Starch Synthase Gene and Construction of Plant Expressing Vector[J]. Journal of Agricultural Biotechnology, 2007, 15(4): 673-676
Authors:QIAO Guang-ming  ZHANG Ming-hao  LI Zhong-cheng  CHEN Zheng-hua
Affiliation:1. College of Life Science and Engineering, Southwest University of Science and Technology, Mianyang 621010, China; 2. College of Biological Science and Medical Engineering, Southeast University, Nanjing 210096,China; 3.Postdoctoral Scientific Research Station of Gansu Yasheng Industrial (Group
Abstract:
Keywords:granule-bound starch synthase  gene cloning  pointing mutation  amalgamation PCR  plant expressing vector
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