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不同pH梯度的IPG胶条对绿竹叶片蛋白双向电泳的比较
引用本文:沈少炎,吴玉香,姚旺,荣俊冬,何天友,陈礼光,郑郁善.不同pH梯度的IPG胶条对绿竹叶片蛋白双向电泳的比较[J].安徽农业大学学报,2016,43(5):749-754.
作者姓名:沈少炎  吴玉香  姚旺  荣俊冬  何天友  陈礼光  郑郁善
作者单位:1. 福建农林大学园林学院,福州350002;福建农林大学竹类研究所,福州350002;2. 福建农林大学林学院,福州350002;福建农林大学竹类研究所,福州350002;3. 福建农林大学园林学院,福州350002;福建农林大学林学院,福州350002;福建农林大学竹类研究所,福州350002
基金项目:福建省科技重大专项(2013NZ0001)资助。
摘    要:双向电泳(2-DE)技术是研究蛋白组学的有效途径和重要手段,而在双向电泳第一向中使用不同pH梯度的IPG胶条,是对双向电泳技术研究的深入。利用改良的TCA/丙酮与Tris-饱和酚提取法,提取纯度更高的绿竹叶片全蛋白,并在双向电泳中使用不同pH梯度的IPG胶条,检测其对绿竹叶片双向电泳图谱的影响。结果表明,蛋白样品上样量为20μg时,在7 cm的pH3-10L、pH3-10NL、pH5-8L 3种胶条中,pH5-8L的胶条在双向电泳的凝胶图谱上显现的蛋白点数目最多,约有400个,而且蛋白点的分布较其他2个胶条的结果更为均匀,清晰度更高;pH3-10NL的胶条的图谱上显现的蛋白点要比同一跨度的pH3-10L的胶条更多;通过3种胶条的对比可以使绿竹叶片双向电泳的分辨率显著提高。对于在pH5-8L显现出来的4个蛋白点进行MALDI-TOF-MS质谱分析,成功鉴定出4个蛋白点,其中3个蛋白点在pH3-10L胶条的双向电泳中是没有显现出来的,这些蛋白对于植物生物功能的发挥具有意义。试验表明了对于一些低丰度蛋白及小分子量蛋白的检测和鉴定,可以利用pH梯度较小的固化胶条进行双向电泳试验。

关 键 词:双向电泳  绿竹叶片  蛋白提取  IPG胶条
收稿时间:1/3/2016 12:00:00 AM

Effects of IPG strips of different pH gradients on 2-DE of Dendrocalamopsis oldhami leaf's protein
SHEN Shaoyan,WU Yuxiang,YAO Wang,RONG Jundong,HE Tianyou,CHEN Liguang and ZHENG Yushan.Effects of IPG strips of different pH gradients on 2-DE of Dendrocalamopsis oldhami leaf's protein[J].Journal of Anhui Agricultural University,2016,43(5):749-754.
Authors:SHEN Shaoyan  WU Yuxiang  YAO Wang  RONG Jundong  HE Tianyou  CHEN Liguang and ZHENG Yushan
Institution:College of Landscape,Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002; Institute of Bamboo,Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002,College of Landscape,Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002; Institute of Bamboo,Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002,College of Forestry,,Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002; Institute of Bamboo,Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002,College of Forestry,,Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002; Institute of Bamboo,Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002,College of Landscape,Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002; Institute of Bamboo,Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002,College of Forestry,,Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002; Institute of Bamboo,Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002 and College of Landscape,Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002; College of Forestry,,Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002; Institute of Bamboo,Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002
Abstract:
Keywords:Two-dimensional electrophoresis  Dendrocalamopsis oldhami leaf  protein extraction  IPG gel
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