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巨桉EgrCBF3基因的克隆与逆境响应表达分析
引用本文:王京京,童再康,黄程前.巨桉EgrCBF3基因的克隆与逆境响应表达分析[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2013,41(7):113-118.
作者姓名:王京京  童再康  黄程前
作者单位:浙江农林大学 林业与生物技术学院;浙江农林大学 林业与生物技术学院;浙江农林大学 林业与生物技术学院
基金项目:浙江省科技厅重大科技专项重点农业项目(2009C12098);国家自然科学基金项目(31270657)
摘    要:【目的】克隆巨桉(Eucalyptus grandis)抗逆相关基因EgrCBF3(GenBank登录号:JQ068829)的全长cDNA序列,分析EgrCBF3在低温、干旱、脱落酸(ABA)处理和高盐条件下的表达。【方法】利用RT-PCR结合RACE技术,克隆巨桉抗逆相关基因EgrCBF3全长cDNA序列;分析正常条件下,巨桉根、茎和叶中EgrCBF3的表达情况;同时采用qRT-PCR,分析不同低温(0,2,4,6,8℃)和4℃处理不同时间(2,4,8,24和48h),以及干旱、ABA和高盐等逆境条件下EgrCBF3的响应表达情况。【结果】EgrCBF3cDNA全长1 161bp,含有1个675bp的ORF,编码224个氨基酸,包含1个AP2结构域。该基因编码的蛋白与蓝桉中的CBF蛋白同源性最高,达97%。EgrCBF3在巨桉的叶、茎和根中均有表达,但表达量无明显差异。对不同低温和4℃不同处理时间条件下EgrCBF3表达的qRT-PCR分析表明,EgrCBF3基因受低温诱导,在2℃条件下诱导表达量最强;在4℃条件下随低温时间的延长,其诱导表达特性不变,仅略有波动。在100μmol/L ABA、200mmol/L NaCl和干旱处理条件下,EgrCBF3的表达不受ABA和盐胁迫的影响,但在干旱胁迫下被诱导。【结论】EgrCBF3响应低温胁迫诱导,同时可能也参与了干旱胁迫的逆境响应机制。

关 键 词:巨桉  EgrCBF3基因  基因克隆  表达分析
收稿时间:2012/9/24 0:00:00

Isolation and expression analysis under stress of EgrCBF3 in Eucalyptus grandis
WANG Jing-jing,TONG Zai-kang,HUANG Cheng-qian,WANG Shuai,CHENG Long-jun.Isolation and expression analysis under stress of EgrCBF3 in Eucalyptus grandis[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2013,41(7):113-118.
Authors:WANG Jing-jing  TONG Zai-kang  HUANG Cheng-qian  WANG Shuai  CHENG Long-jun
Institution:(College of Forestry and Biotechnology,Zhejiang Agriculture and Forestry University,Lin’an,Zhejiang 311300,China)
Abstract:
Keywords:Eucalyptus grandis  EgrCBF3  gene clone  gene expression
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