荧光定量RT-PCR检测鸡传染性支气管炎病毒方法的建立及应用 |
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引用本文: | 屈素洁,张步娴,梁媛,粟艳琼,莫胜兰,邹联斌,胡杰,陆文俊,李军.荧光定量RT-PCR检测鸡传染性支气管炎病毒方法的建立及应用[J].黑龙江畜牧兽医,2015(3):134-136. |
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作者姓名: | 屈素洁 张步娴 梁媛 粟艳琼 莫胜兰 邹联斌 胡杰 陆文俊 李军 |
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作者单位: | 广西区动物疫病预防控制中心 |
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基金项目: | 广西区水产畜牧兽医局科技项目(桂渔牧科1204936) |
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摘 要: | 为了建立一种快速的新城疫病毒(NDV)病原检测方法,试验针对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)基因序列保守区域设计1对特异性引物和1条特异性探针,通过构建重组阳性标准质粒的方法建立了检测IBV核酸的荧光定量PCR方法,优化反应体系和反应条件后进行特异性、敏感性、重复性试验。结果表明:该检测方法特异性强,与其他禽源病毒如NDV、传染性喉气管炎病毒(ILTV)、传染性法氏囊病毒(IBDV)、禽流感病毒(AIV)、马立克病毒(MDV)均不发生交叉反应;该方法可检测到3.1×101拷贝/μL的病毒核酸,比常规RT-PCR的敏感性高100倍;重复性试验的变异系数小于2%。说明研究建立的Real-time RT-PCR检测方法特异性强、灵敏度高、重复性好,可用于IBV的定量检测。
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关 键 词: | 鸡传染性支气管炎病毒(IBV) 病毒检测 荧光定量PCR 特异性 敏感性 重复性 |
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