| 四川省猕猴桃病毒A外壳蛋白基因的序列分析、原核表达及抗血清制备 |
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| 引用本文： | 吕蕊,彭期定,杨婷,林宏辉,董家红,席德慧.四川省猕猴桃病毒A外壳蛋白基因的序列分析、原核表达及抗血清制备[J].果树学报,2019(9). |
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| 作者姓名： | 吕蕊 彭期定 杨婷 林宏辉 董家红 席德慧 |
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| 作者单位： | 四川大学生命科学学院·生物资源与生态环境教育部重点实验室;云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所·云南省农业生物技术重点实验室·农业部西南作物基因资源与种质创制重点实验室 |
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| 摘 要： | 【目的】研究猕猴桃病毒A(Actinidia virus A,AcVA)的发生及其多样性,为我国猕猴桃产业中AcVA病毒的快速检测、科学防控以及猕猴桃品种选育提供科学依据。【方法】通过巢式PCR从四川省猕猴桃感病叶片中扩增AcVA CP基因序列,进行序列分析和同源性比对;构建AcVA CP基因的原核表达载体,诱导目的蛋白表达后制备抗血清,用Western blot检测效价。【结果】克隆到3个AcVA四川分离株的完整CP基因序列,成功构建了pET28a-AcVA-DJY4-CP重组质粒,原核表达目的蛋白并制备出特异性抗血清,效价达到1∶5 000。【结论】首次获得了3个AcVA四川分离株,丰富了AcVA的序列多样性,并探索了原核表达的最佳条件,制备了高效价抗血清,为今后AcVA病毒的快速检测和防控提供了技术支撑。
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| 关 键 词： | 猕猴桃病毒A 外壳蛋白 序列分析 原核表达 抗血清制备 |
Sequence analysis,prokaryotic expression and antiserum preparation of coat protein gene of Actinidia virus A in Sichuan province |
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