| 葡萄果实cDNA文库的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 董清华,冯永庆,秦岭,王有年,沈元月.葡萄果实cDNA文库的构建及鉴定[J].分子植物育种,2007,5(1):117-120. |
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| 作者姓名： | 董清华 冯永庆 秦岭 王有年 沈元月 |
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| 作者单位： | 北京农学院植物科学技术系,北京,102206 |
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| 基金项目： | 北京农学院引进人才项目
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北京市属市管高校人才强教计划项目 |
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| 摘 要： | 构建葡萄果实cDNA文库是研究果实发育相关基因表达调控的基础工作.本实验从巨峰葡萄果实中提取了高质量的RNA,利用MMLV反转录酶把总RNA中的mRNA反转录成cDNA第一链,用特异引物进行LD-PCR扩增合成双链cDNA.将分级纯化的带有粘性末端双链cDNA与λTrip Ⅰ Ex2载体连接,重组载体体外包埋成为cDNA原始文库.初步鉴定原始文库的滴度为1.32×106 pfu/mL,文库扩增后滴度达1.45×1010 pfu/mL.从扩增文库中随机挑取250个克隆进行PCR鉴定,结果表明重组率为98.7%,插入片段大小在0.5～2.0 kb之间,因此,本研究成功构建了葡萄果实cDNA文库.
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| 关 键 词： | 巨峰葡萄(Vitis vinifera cv.Kyoho) 葡萄果实 RNA提取 cDNA文库 |
Construction of the cDNA Library of Kyoho Grape Fruit |
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| Dong Qinghua,Feng Yongqing,Qin Ling,Wang Younian,Shen Yuanyue.Construction of the cDNA Library of Kyoho Grape Fruit[J].Molecular Plant Breeding,2007,5(1):117-120. |
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| Authors: | Dong Qinghua Feng Yongqing Qin Ling Wang Younian Shen Yuanyue |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Kyoho grape (Vitis vinifera cv Kyoho) Grape fruit RNA extract cDNA library |
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