拟南芥CDR6基因过表达载体构建及过量表达植株筛选鉴定 |
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引用本文: | 董万春,樊婷婷,阳立波,江海坤,张其安,方凌,倪娇娇,管灵霞,曹树青. 拟南芥CDR6基因过表达载体构建及过量表达植株筛选鉴定[J]. 安徽农业科学, 2015, 0(13). DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2015.13.025 |
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作者姓名: | 董万春 樊婷婷 阳立波 江海坤 张其安 方凌 倪娇娇 管灵霞 曹树青 |
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作者单位: | 合肥工业大学生物与食品工程学院,安徽合肥,230009;安徽省农业科学院园艺研究所,安徽合肥,230009 |
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基金项目: | 安徽省自然科学基金青年基金,安徽省科技攻关项目 |
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摘 要: | [目的]以拟南芥为材料克隆CDR6基因,构建CDR6基因的过量表达载体并筛选鉴定获得过表达植株.[方法]提取拟南芥mR-NA,反转录成cDNA,并以此为模板克隆CDR6基因CDS全长,通过限制性内切酶切割、T4 DNA连接酶连接,将CDR6基因CDS全长连接到带有35S强启动子的pXB094载体上;然后转化至Trans1-T1感受态细胞中,菌落PCR鉴定阳性单克隆并测序确认.将重组质粒转化至根瘤农杆菌GV3101菌株,通过浸花法侵染拟南芥野生型植株,通过抗性筛选和鉴定获得预期的转基因植株.[结果]菌落PCR鉴定和测序结果表明CDR6基因已成功构建至pXB094载体;通过抗性筛选并鉴定获得了过量表达阳性植株.[结论]筛选和鉴定获得的过量表达植株为研究CDR6基因的分子功能奠定了基础.
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关 键 词: | 拟南芥 CDR6基因 过量表达载体 转基因植株 |
Construction of Arabidopsis CDR6 Over-expression Carrier and Identification of Stably Transgenic Lines |
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Abstract: | |
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Keywords: | Arabidopsis thaliana CDR6 Over-expression carrier Transgenic plant |
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