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拟南芥CDR6基因过表达载体构建及过量表达植株筛选鉴定
引用本文:董万春,樊婷婷,阳立波,江海坤,张其安,方凌,倪娇娇,管灵霞,曹树青.拟南芥CDR6基因过表达载体构建及过量表达植株筛选鉴定[J].安徽农业科学,2015(13).
作者姓名:董万春  樊婷婷  阳立波  江海坤  张其安  方凌  倪娇娇  管灵霞  曹树青
作者单位:合肥工业大学生物与食品工程学院,安徽合肥,230009;安徽省农业科学院园艺研究所,安徽合肥,230009
基金项目:安徽省自然科学基金青年基金,安徽省科技攻关项目
摘    要:目的]以拟南芥为材料克隆CDR6基因,构建CDR6基因的过量表达载体并筛选鉴定获得过表达植株.方法]提取拟南芥mR-NA,反转录成cDNA,并以此为模板克隆CDR6基因CDS全长,通过限制性内切酶切割、T4 DNA连接酶连接,将CDR6基因CDS全长连接到带有35S强启动子的pXB094载体上;然后转化至Trans1-T1感受态细胞中,菌落PCR鉴定阳性单克隆并测序确认.将重组质粒转化至根瘤农杆菌GV3101菌株,通过浸花法侵染拟南芥野生型植株,通过抗性筛选和鉴定获得预期的转基因植株.结果]菌落PCR鉴定和测序结果表明CDR6基因已成功构建至pXB094载体;通过抗性筛选并鉴定获得了过量表达阳性植株.结论]筛选和鉴定获得的过量表达植株为研究CDR6基因的分子功能奠定了基础.

关 键 词:拟南芥  CDR6基因  过量表达载体  转基因植株

Construction of Arabidopsis CDR6 Over-expression Carrier and Identification of Stably Transgenic Lines
Abstract:
Keywords:Arabidopsis thaliana  CDR6  Over-expression carrier  Transgenic plant
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