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Zur Wirkung von Follikelflüssigkeit auf die Befruchtung in vitro gereifter Oozyten des Rindes
Authors:Martha Böttcher  Benita Kluge  Karin Tomalak  Elvira Meyer  W Lange
Institution:Fachbereich Agarwissenschaften der Universität Rostock, Institut für Veterinärmedizin;Forschungszentrum für Tierproduktion –Abteilung Biochemie Rostock/Dummerstorf
Abstract:Inhalt Follikelflüssigkeit aus Follikeln des Rindes am Tag des Östrus gewonnen, wurde als Serumanalogon zum Kultivierungsmedium TCM 199 zugesetzt. Die Supplementierung des TCM mit 20%östrischer Follikelflüssigkeit (ÖFF) in der Reifungsphase und während der Zygotenkultivierung erbrachte 6–7 Tage post inseminationem einen Anteil an Morulae und Blastozysten von 41,7% (30,8–47,8%). Eine Reduzierung des Anteils ÖFF auf 10% zog einen Abfall transfertauglicher Rinderembryonen auf 9,2% (2,6–16,9%) nach sich. In einer Kurzzeitkultivierung von bis zu 90 h post inseminationem wurden außerdem verschiedene Serumanaloga, im Anteil von 10%, wie fetales Kälberserum (FKS), ÖFF und Follikelflüssigkeit (NÖFF) aus nicht östrischen Follikeln (≥ 10mm Durchmesser) auf ihre Wirksamkeit während verschiedener In-vitro-Phasen verglichen. Von den drei getesteten Seren erwies sich die ÖFF als der wirksamste Zusatz mit 19,9% morphologisch intakten 8- bis 16-Zeller. Das Ergebnis scheint unabhängig davon, ob die Applikation kontinuierlich während aller In-vitro-Phasen oder nur in der Reifungsphase erfolgte. Eine Schlüsselposition der Oozy tenreifung für die In-vitro-Fertilisation wird besonders deutlich. Contents: Influence of follicular fluid on fertilization of in vitro matured bovine oocytes Follicular fluid obtained from bovine follicles on the day of estrus was added to TCM 199 culture medium as a serum analogue. TCM supplementation with 20% estric follicular fluid (EFF) during maturation and zygote cultivation produced a morulae and blastozyst yield of 41,7% (30,8–47,8%) 6–7 days after insemination. Reduction of the EFF fraction to 10% reduced the yield of transferable bovine embryos to 9,2% (2,6–16,9%). In a short term cultivation experiment lasting up to 90 h after insemination, the effects of 10% supplementation with different serum analogues fetal calf serum (FCS), EFF and follicular fluid (NEFF) fiom non-estric follicles (≥10mm diameter) during various in vitro phases were compared. EFF with a yield of 19,9% morphologically intact 8 to 16 cell stages proved to be the most effective of the three sera. This yield is not apparently affected by whether the serum is applied continuously during all phases of in vitro development or only during the maturation phase. The oocyte maturation phase is obviously the key phase for successful in vitro fertilization.
Keywords:in vitro maturation  in vitro fertilization  fetal calf serum  follicular fluid  insulin-like growth factor I
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