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杠柳新苷T人工抗原合成及多克隆抗体制备
引用本文:高履桐,陈翠翠,师宝君.杠柳新苷T人工抗原合成及多克隆抗体制备[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2013,41(2):182-188.
作者姓名:高履桐  陈翠翠  师宝君
作者单位:西北农林科技大学 农药研究所;西北农林科技大学 农药研究所;西北农林科技大学 农药研究所
基金项目:国家公益性行业(农业)科研专项(200903052);国家自然科学基金项目(30870344,31171868);中央高校基本科研业务费专项(QN2011058)
摘    要:【目的】合成并鉴定杠柳新苷T人工抗原,制备多克隆抗体,为进一步开展杠柳新苷类化合物作用机理的研究奠定基础。【方法】以杠柳新苷T为起始反应物,与丁二酸酐反应生成杠柳新苷T的衍生物(半抗原),采用HPLC-ELSD、MS和NMR对衍生物的结构进行鉴定;将半抗原与载体蛋白(BSA和OVA)进行偶联,采用紫外图谱对人工抗原进行鉴定,并采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)法测定结合比;以乳化的人工抗原免疫8周龄雌性Balb/c小鼠获得杠柳新苷T的多克隆抗体,并测定其效价。【结果】成功合成杠柳新苷T的半抗原和人工抗原,半抗原和载体蛋白(BSA和OVA)的结合比分别为5∶1和7∶1。免疫小鼠后产生针对杠柳新苷T的特异性抗体,其效价为1∶1 600,对杠柳新苷T的半数抑制浓度(IC50)为12.429 4μg/mL。【结论】制备了杠柳新苷T的多克隆抗体,可以用于杠柳新苷T作用靶标的定位研究。

关 键 词:杠柳新苷T  半抗原  人工抗原  多克隆抗体
收稿时间:2012/5/22 0:00:00

Synthesis of artificial antigen and preparation of polyclonal antibody against Periplocoside T
GAO Lü-tong,CHEN Cui-cui,SHI Bao-jun,HU Zhao-nong.Synthesis of artificial antigen and preparation of polyclonal antibody against Periplocoside T[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2013,41(2):182-188.
Authors:GAO Lü-tong  CHEN Cui-cui  SHI Bao-jun  HU Zhao-nong
Institution:(Institution of Pesticide Research,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China)
Abstract:
Keywords:Periplocoside T  hapten  antigen  polyclonal antibody
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