| 鲢抗菌肽Hepcidin的基因克隆和表达及抑菌活性分析 |
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| 引用本文： | 周卫军, 刘振兴, 柯浩, 马艳平, 郝乐, 徐明芳. 鲢抗菌肽Hepcidin的基因克隆和表达及抑菌活性分析[J]. 南方水产科学, 2014, 10(3): 58-64. DOI: 10.3969/j.issn.2095-0780.2014.03.009 |
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| 作者姓名： | 周卫军 刘振兴 柯浩 马艳平 郝乐 徐明芳 |
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| 作者单位： | 1.暨南大学生物工程学系实验室,广东 广州 510630;;2.广东省农业科学院动物卫生研究所,广东省兽医公共卫生公共实验室,广东 广州 510640 |
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| 基金项目： | 广州市农业科技攻关项目（GZCQC1202FG04002-01）;广东省海洋渔业科技推广专项（A201201C01）;广州市科技计划项目（201300000064）;广东省科技计划项目（2008B020700006） |
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| 摘 要： | 利用同源克隆的方法从鲢（Hypophthalmichthys molitrix）的肝脏中克隆出抗菌肽Hepcidin cDNA（GenBank登入号KF312213）后,通过pET32a（+）构建含抗菌肽Hepcidin的重组质粒的pET-Hep/Rosetta菌株,在37 ℃、28 ℃和16 ℃下分别用0.5 mmolL-1和1.0 mmolL-1 IPTG诱导表达,产物用Ni SepharoseTM亲和层析柱纯化并进行体外抑菌试验。鲢Hepcidin cDNA总长度755 bp,ORF为282 bp,5'UTR为108 bp,3'UTR为365 bp,编码93氨基酸,信号肽24个氨基酸,前域42个氨基酸和成熟肽27个氨基酸。pET-Hep/Rosetta在28 ℃和16 ℃主要是可溶性表达,37 ℃主要是包涵体表达。纯化的产物经15% SDS-PAGE电泳验证为目的产物。目的产物、pET32/Rosetta产物以及氟苯尼考的体外抑菌试验表明,目的表达产物对无乳链球菌（Streptococcus agalactiae）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila)等具有很好的抑菌效果。
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| 关 键 词： | 鲢 Hepcidin 基因克隆 原核表达 抑菌效果 |
| 收稿时间： | 2013-12-06 |
| 修稿时间： | 2014-02-19 |
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