| 猪伪狂犬病毒gE蛋白单克隆抗体制备与鉴定 |
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| 引用本文： | 雷有玲,李国泰,鲍玉林,刘秀清,张文.猪伪狂犬病毒gE蛋白单克隆抗体制备与鉴定[J].畜牧与兽医,2018(1):109-112. |
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| 作者姓名： | 雷有玲 李国泰 鲍玉林 刘秀清 张文 |
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| 作者单位： | 青海省门源县泉口镇兽医站;青海畜牧兽医职业技术学院; |
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| 摘 要： | 为获得猪伪狂犬病毒(PRV)gE蛋白单克隆抗体,选择原核表达的重组gE蛋白免疫6周龄BALB/c雌性小鼠,将其脾细胞与SP2/0进行融合,经间接ELISA筛选阳性杂交瘤细胞,结果获得了2株能稳定分泌抗PRV gE蛋白的杂交瘤细胞,命名为E3B8和E5C11。间接ELISA检测2株杂交瘤细胞的培养上清液抗体效价为1∶6.4×10~3,腹水的抗体效价分别达到1∶3.28×10~6和1∶6.55×10~6。2株杂交瘤细胞的染色体数分别为105和108。E3B8亚类鉴定重链为IgG1,轻链为κ链;E5C11亚类鉴定重链为IgG2b,轻链为κ链。Western blot检测显示2株单克隆抗体腹水均能与PRV重组gE蛋白发生特异性反应,间接免疫荧光试验(IFA)检测显示2株单克隆抗体均能与PRV分离毒株感染的BHK-21细胞发生特异性反应,交叉反应性检测显示2株单克隆抗体与常见病毒不发生交叉反应。表明制备的2株gE蛋白单克隆抗体效价高、特异性强,为gE蛋白结构与功能分析以及PRV免疫诊断试剂盒的开发奠定了基础。
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| 关 键 词： | 伪狂犬病毒 gE蛋白 单克隆抗体 制备 鉴定 |
Preparation and identification of monoclonal antibodies against gE protein of pseudorabies virus |
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