| 栓皮栎ISSR反应体系的建立 |
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| 引用本文： | 李娜,张存旭,崔晓燕,蒋鸿刚,郭乐,刘伟.栓皮栎ISSR反应体系的建立[J].北方园艺,2014(13). |
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| 作者姓名： | 李娜 张存旭 崔晓燕 蒋鸿刚 郭乐 刘伟 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学林学院,陕西杨陵,712100;西北农林科技大学林学院,陕西杨陵,712100;西北农林科技大学林学院,陕西杨陵,712100;西北农林科技大学林学院,陕西杨陵,712100;西北农林科技大学林学院,陕西杨陵,712100;西北农林科技大学林学院,陕西杨陵,712100 |
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| 基金项目： | 林业公益性行业专项资助项目(21004011);西北农林科技大学唐仲英育种基金资助项目 |
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| 摘 要： | 以栓皮栎叶片为试材,采用单因素试验设计对栓皮栎ISSR反应条件进行系统优化,建立了栓皮栎ISSR的最佳反应体系和扩增程序。结果表明:PCR反应体系总体积为25μL,其中10×Buffer 2.5μL,30ng模板DNA,1.5UTaq聚合酶,2.5mmol/L Mg2+,0.6μmol/L引物,0.3mmol/L dNTPs;扩增程序:94℃预变性1min;94℃变性30s,51.5~59.0℃退火60s,72℃延伸2min,35个循环;最后72℃延伸5min。在此条件下从100条ISSR引物中筛选出12条多态性好、稳定性高的引物对陕西省天然群体共22个栓皮栎个体的DNA进行扩增,共得到166个位点,其中142个为多态位点,多态位点百分率为85.54%,Nei指数为0.2928,Shannon信息指数为0.4381,表明栓皮栎的遗传多样性处于较高水平。
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| 关 键 词： | 栓皮栎 ISSR 体系优化 遗传多样性 |
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