| 一种高产L-赖氨酸枯草芽孢杆菌的构建研究 |
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| 作者姓名： | 夏树立 韩静 王丽学 杨春蕾 刘长悦 王海亮 吴贶 史慧玲 |
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| 作者单位： | 1.天津市畜牧兽医研究所,天津 300380;2.天津市农业科学院信息研究所,天津 300192;3.天津科润农业科技股份有限公司黄瓜研究所,天津 300192;4.天津市现代农业科技创新基地管理中心,天津 301700;5.天津市农业科学院,天津 300192 |
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| 基金项目： | 天津市科技重大专项与工程“农村科技帮扶工程：家禽特色蛋品标准化生产技术集成与应用”(18ZXBFNC00350);天津市农业科学院青年科技创新重点项目“非抗性稳定高产L-赖氨酸枯草芽孢杆菌工程菌株的构建及应用”(201801) |
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| 摘 要： | 为了选育一种非抗性、高产出、遗传稳定性好、低生产成本的L-赖氨酸生产菌株,以辣椒花药和枯草芽孢杆菌为试验材料,以穿梭表达载体pHT43和基因敲除载体pK18mobsacB为媒介,将辣椒花药中的高赖氨酸基因CFLR转化到枯草芽孢杆菌中。经过2次细胞内同源交换和培养基筛选,最终获得不带质粒抗性标记的高产L-赖氨酸枯草芽孢杆菌株CMCC(B)63501/pK18mobsacB-ΔALA::CFLR,该菌株连续传代20次后仍具有明显高于野生型的CFLR基因拷贝数,经HPLC验证,重组菌株L-赖氨酸含量比野生菌株提高了64.89%。结果表明,本研究所构建的非抗性高产L-赖氨酸枯草芽孢杆菌株产量高、遗传稳定性好、低纯化成本,具有良好的应用潜力。
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| 关 键 词： | 辣椒高赖氨酸基因 枯草芽孢杆菌 基因克隆 同源交换 HPLC |
| 收稿时间： | 2019-10-09 |
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