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Ⅱ型圆环病毒山东泰安株的分离鉴定及系统进化分析
引用本文:娄忠子,王天户,董李民,刘思当.Ⅱ型圆环病毒山东泰安株的分离鉴定及系统进化分析[J].山东农业大学学报(自然科学版),2007,38(4):509-514.
作者姓名:娄忠子  王天户  董李民  刘思当
作者单位:1. 山东农业大学动物科技学院基础兽医系,山东,泰安,271018
2. 莱阳市河洛镇兽医站,山东,莱阳,265200
摘    要:采用双抗体夹心ELISA方法和PCR技术对来自山东泰安的病猪组织病料进行猪Ⅱ型圆环病毒(PCV2)检测。将检测为阳性的病料悬液接种无PCV1污染的PK-15细胞进行病毒分离,获得一株PCV2,命名为猪Ⅱ型圆环病毒山东泰安株(PCV2 sdt)。间接免疫荧光试验(IFA)检测可见接种病毒细胞中散在特异性荧光。提取全基因组为模板,进行病毒基因组1号开放阅读框(ORF1)、2号开放阅读框(ORF2)和全基因组序列扩增,得到长度分别约为999bp、749bp和1767bp左右的产物条带。将产物克隆到pMD18-T载体上,构建重组质粒pMD18-T-ORF1、pMD18-T-ORF2和pMD18-T-PCV2。测序结果显示,所分离病毒的ORF1、ORF2和全基因组序列长度分别为945bp、702bp和1767bp。DNAStar生物学软件分析发现,PCV2分离毒株与参考株的全基因组同源性介于95.4%~98.8%之间,ORF1的同源性介于97.0%~98.8%,ORF2的同源性略低,介于91.9%~98.4%之间。

关 键 词:猪Ⅱ型圆环病毒  双抗体夹心ELISA  病毒分离  间接免疫荧光试验
文章编号:1000-2324(2007)04-0509-05
收稿时间:2007-10-18
修稿时间:2007年10月18

ISOLATION AND IDENTIFICATION OF PCV2SDT AND PHYLOGENETIC ANALYSIS
LOU Zhong-zi,WANG Tian-hu,DONG Li-min,LIU Si-dang.ISOLATION AND IDENTIFICATION OF PCV2SDT AND PHYLOGENETIC ANALYSIS[J].Journal of Shandong Agricultural University,2007,38(4):509-514.
Authors:LOU Zhong-zi  WANG Tian-hu  DONG Li-min  LIU Si-dang
Abstract:
Keywords:PCR
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