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小鼠CD40胞外段的原核表达及多克隆抗体的制备
引用本文:曹旗,潘悦,郑宇,王菡,任洪林,胡盼,李岩松,周玉,柳增善,卢士英.小鼠CD40胞外段的原核表达及多克隆抗体的制备[J].湖北农业科学,2020,59(6):130-134.
作者姓名:曹旗  潘悦  郑宇  王菡  任洪林  胡盼  李岩松  周玉  柳增善  卢士英
作者单位:吉林大学动物医学学院/人兽共患病研究所/人兽共患病教育部重点实验室,长春 130062,吉林大学动物医学学院/人兽共患病研究所/人兽共患病教育部重点实验室,长春 130062,吉林大学动物医学学院/人兽共患病研究所/人兽共患病教育部重点实验室,长春 130062,吉林大学动物医学学院/人兽共患病研究所/人兽共患病教育部重点实验室,长春 130062,吉林大学动物医学学院/人兽共患病研究所/人兽共患病教育部重点实验室,长春 130062,吉林大学动物医学学院/人兽共患病研究所/人兽共患病教育部重点实验室,长春 130062,吉林大学动物医学学院/人兽共患病研究所/人兽共患病教育部重点实验室,长春 130062,吉林大学动物医学学院/人兽共患病研究所/人兽共患病教育部重点实验室,长春 130062,吉林大学动物医学学院/人兽共患病研究所/人兽共患病教育部重点实验室,长春 130062,吉林大学动物医学学院/人兽共患病研究所/人兽共患病教育部重点实验室,长春 130062
摘    要:为了探讨CD40抗体与CD40结合对B细胞应答小分子半抗原的增强作用,利用TRIzol法提取BALB/c小鼠脾脏总RNA,并反转录成cDNA;根据CD40的胞外段CDS设计引物,通过PCR扩增目的基因,构建pGEX4T-1-CD40表达载体,进行原核表达及多克隆抗体制备。结果表明,成功扩增了522 bp的目的基因,表达并纯化获得了45 ku的CD40重组蛋白,多克隆抗体抗体不但可与重组蛋白结合,与小鼠脾脏天然CD40蛋白也可以特异性结合。说明CD40重组蛋白表达成功,且制备的抗体有望模拟CD40L为B细胞活化提供第二信号。

关 键 词:CD40  原核表达  多克隆抗体  半抗原  免疫增强

Prokaryotic expression of mouse extracellular domain of CD40 and preparation of polyclonal antibody
CAO Qi,PAN Yue,ZHENG Yu,WANG Han,REN Hong-lin,HU Pan,LI Yan-song,ZHOU Yu,LIU Zeng-shan,LU Shi-ying.Prokaryotic expression of mouse extracellular domain of CD40 and preparation of polyclonal antibody[J].Hubei Agricultural Sciences,2020,59(6):130-134.
Authors:CAO Qi  PAN Yue  ZHENG Yu  WANG Han  REN Hong-lin  HU Pan  LI Yan-song  ZHOU Yu  LIU Zeng-shan  LU Shi-ying
Abstract:
Keywords:
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