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牦牛ACTA1基因启动子区克隆、DNA甲基化与组织表达相关性分析
引用本文:杨勤,柴志欣,王吉坤,王会,钟金城.牦牛ACTA1基因启动子区克隆、DNA甲基化与组织表达相关性分析[J].华北农学报,2020,35(1):222-229.
作者姓名:杨勤  柴志欣  王吉坤  王会  钟金城
作者单位:西南民族大学 青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省、教育部重点实验室,四川 成都 610041,西南民族大学 青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省、教育部重点实验室,四川 成都 610041,西南民族大学 青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省、教育部重点实验室,四川 成都 610041,西南民族大学 青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省、教育部重点实验室,四川 成都 610041,西南民族大学 青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省、教育部重点实验室,四川 成都 610041
基金项目:国家肉牛牦牛产业技术体系;西南民族大学研究生创新型科研项目;四川省科技厅应用基础项目
摘    要:为了探究骨骼肌α肌动蛋白1(ACTA1)基因在肌肉和脂肪等6个组织中的甲基化状态及mRNA表达水平,以类乌齐牦牛、麦洼牦牛为研究对象,成功克隆了牦牛ACTA1基因启动子区序列,且采用重亚硫酸氢盐测序法(BSP)检测ACTA1基因启动子区甲基化模式,并通过实时荧光定量PCR检测ACTA1基因在臀大肌、心脏、肾脏、肺脏、肝脏和脂肪组织中的mRNA表达水平。结果显示,牦牛ACTA1基因转录起始位点上游及第一外显子区部分序列总长为1 028 bp;BSP法分析发现肌肉组织DNA甲基化水平最低,脂肪组织甲基化率最高,其中,类乌齐牦牛臀大肌、心脏、肾脏、肺脏、肝脏和脂肪的甲基化概率分别为6.25%,6.88%,20.00%,16.25%,26.25%,29.38%,麦洼牦牛臀大肌、心脏、肾脏、肺脏、肝脏和脂肪的甲基化概率分别为5.00%,7.50%,18.13%,20.00%,26.25%,28.75%;ACTA1基因mRNA表达量在肾脏、肺脏、肝脏和脂肪均极显著低于臀大肌(P0.01),且显著低于心脏(P0.05),类乌齐牦牛和麦洼牦牛心脏mRNA表达量具有显著性差异(P0.05),类乌齐牦牛肺脏组织甲基化率显著低于麦洼牦牛(P0.05),其他各组织甲基化率和mRNA表达量差异均不显著(P0.05),各组织甲基化水平与ACTA1基因mRNA表达量呈极显著负相关(r=-0.797,P=0.002)。结果表明,ACTA1基因DNA甲基化模式对肌肉发育具有一定的调控作用,可为牦牛遗传育种表观遗传标记提供部分数据支持。

关 键 词:牦牛  ACTA1基因  启动子区  DNA甲基化  重亚硫酸氢盐测序  组织表达

Cloning of ACTA1 Gene Promoter Region and Correlation Analysis Between DNA Methylation and Tissue Expression in Yak
YANG Qin,CHAI Zhixin,WANG Jikun,WANG Hui,ZHONG Jincheng.Cloning of ACTA1 Gene Promoter Region and Correlation Analysis Between DNA Methylation and Tissue Expression in Yak[J].Acta Agriculturae Boreali-Sinica,2020,35(1):222-229.
Authors:YANG Qin  CHAI Zhixin  WANG Jikun  WANG Hui  ZHONG Jincheng
Abstract:
Keywords:
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