禽新型黄病毒RT-LAMP检测方法的建立 |
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引用本文: | 李兆龙,陈仕龙,林锋强,王劭,程晓霞,朱小丽,陈少莺.禽新型黄病毒RT-LAMP检测方法的建立[J].畜牧兽医学报,2012,43(4):659-663. |
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作者姓名: | 李兆龙 陈仕龙 林锋强 王劭 程晓霞 朱小丽 陈少莺 |
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作者单位: | 福建省农业科学院畜牧兽医研究所,福州350013;福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福州350013 |
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基金项目: | 福建省农科院创新团队项目,福建省公益类科研院所专项 |
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摘 要: | 根据环介导等温扩增技术(LAMP),建立了一种适用于禽新型黄病毒的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)快速检测方法。根据禽新型黄病毒E蛋白基因序列,在保守区设计了一套针对禽新型黄病毒基因8个区域的6条特异性引物,并对反应条件进行优化。结果表明该方法对NDRV、GPV、MDRV、NDV、ILTV、FPV均无扩增反应,并可通过反应液是否有沉淀或向反应液中加入荧光染料来对结果进行可视化观察;扩增反应只需要在常规水浴锅中进行,45min内可完成反应;该方法对禽新型黄病毒RNA的最小检测限为1pg,灵敏度是一步法RT-PCR方法的100倍。本研究建立的RT-LAMP方法简便、快速、灵敏、特异,适合在基层进行禽新型黄病毒的快速检测。
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关 键 词: | 禽新型黄病毒 RT-LAMP 检测方法 |
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