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猪三十九肽胆囊收缩素(CCK39)基因的克隆和表达
引用本文:曹军,成大荣,徐建生,孙怀昌,唐波,吕玲.猪三十九肽胆囊收缩素(CCK39)基因的克隆和表达[J].农业生物技术学报,2005,13(5):612-615.
作者姓名:曹军  成大荣  徐建生  孙怀昌  唐波  吕玲
作者单位:扬州大学兽医学院,扬州,225009
摘    要:以猪十二指肠中提取的总RNA为模板,根据GenBank已发表的猪三十九肽胆囊收缩素(CCK39)基因序列设计1对特异性引物。用RT-PCR扩增CCK39基因的cDNA,纯化后克隆人pUC18载体,BamHⅠ/EcoRⅠ双酶切后插入pGEX-6P-1质粒获得原核表达载体。0.5mmol/L IPTG诱导表达并纯化产物,以纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备单因子血清;用抗GST抗体和自制的抗CCK39的单因子血清Westen blot检测融合蛋白。结果表明:成功地克隆出CCK39基因的cDNA,构建的原核表达载体pGEX-CCK39成功地表达约32kD的融合蛋白,抗GST抗体和抗CCK39单因子血清能识别融合蛋白,证明获得的融合蛋白具有较好的抗原性,为制备抗CCK抗体及研究CCK的各种生理功能提供大量、低廉和抗原性较强的胆囊收缩素。

关 键 词:胆囊收缩素  克隆  表达  抗GST抗体  单因子血清
收稿时间:2004-10-08
修稿时间:2004-11-01

Cloning and Exprssion of Cholecystokinin-39(CCK39) Gene of Pig
CAO Jun,CHENG Da-Rong,XU Jian-Sheng,SUN Huai-Chang,TANG Bo,LV Ling.Cloning and Exprssion of Cholecystokinin-39(CCK39) Gene of Pig[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2005,13(5):612-615.
Authors:CAO Jun  CHENG Da-Rong  XU Jian-Sheng  SUN Huai-Chang  TANG Bo  LV Ling
Abstract:
Keywords:cholecystokinin-39  cloning  expression  anti-GST antibody  monospecific antiserum
本文献已被 万方数据 等数据库收录!
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