猪δ冠状病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立与应用

为灵敏、快速检测猪δ冠状病毒（porcine deltacoronavirus，PDCoV），根据PDCoV M基因保守区域设计引物和探针，建立了一种PDCoV实时荧光RT-PCR检测方法，并评价了该方法的特异性、灵敏性和重复性。结果显示，该方法的拷贝数对数值与Ct值在1.3×103~1.3×107 copies/μL拷贝数浓度范围内呈现良好的线性关系，R2 = 0.994；最低检出限为13 copies/μL，且无非特异性扩增；批内和批间重复性试验变异系数（CV）为0.24%~2.15%，均小于3%。利用该方法和普通RT-PCR对42份临床样品同时进行检测，发现本方法比普通RT-PCR灵敏性更高，二者符合率为95.2%。以上结果表明，本试验建立的实时荧光RT-PCR方法灵敏、特异、可靠，可用于PDCoV的临床检测和流行病学调查。

Establishment and Application of a Real-time Fluorescent RT-PCR Assay for Porcine Deltacoronavirus