| 晋南黄牛IFN-α基因的克隆、表达及抗病毒活性研究 |
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| 引用本文： | 史喜菊,夏春,汪明.晋南黄牛IFN-α基因的克隆、表达及抗病毒活性研究[J].中国预防兽医学报,2004,26(2):110-114. |
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| 作者姓名： | 史喜菊 夏春 汪明 |
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| 作者单位： | 中国农业大学,动物医学院,北京,100094 |
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| 摘 要： | 本研究通过PCR从晋南黄牛(Yellow cattle)基因组DNA中克隆了IFN-α(BoIFN-α)基因,PCR产物酶切后直接与载体PQE30连接,构建重组质粒PQE30/BoIFN-α,进行测序和诱导表达.测序结果表明,晋南黄牛IFN-α基因全长498个核苷酸,含一个开放阅读框(ORF),编码166个氨基酸的成熟蛋白,与所报道的BoIFN-α 8个亚型中D亚型最接近,氨基酸序列同源性为97.0%.表达产物经SDS-PAGE和Western blot分析,表达出20kD的融合蛋白,表达量占菌体总蛋白的20%,表达产物以包涵体形式存在,包涵体占沉淀蛋白的35%.包涵体提取物用8 M尿素溶解变性,经尿素和PBS透析复性后初步纯化.重组牛IFN-α(rBoIFN-α)初提物在MDBK-VSV和CEF-VSV上的活性分别为2.3～6.5×106U/mg和1.3～4.1×105U/mg,对牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)有一定的抑制作用,抗病毒效价达到8.2×105U/mg.结果显示大肠杆菌可以高效表达具有生物学活性的rBoIFN-α.
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| 关 键 词： | 晋南黄牛 a-干扰素基因 克隆 表达 抗病毒活性 |
| 文章编号： | 1008-0589(2004)02-0110-05 |
| 修稿时间： | 2003年6月25日 |
Cloning,expression and studies on antiviral activities of IFN-α gene of Jinnan yellow cattle |
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| SHI Xi-ju,XIA Chun,WANG Ming.Cloning,expression and studies on antiviral activities of IFN-α gene of Jinnan yellow cattle[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2004,26(2):110-114. |
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| Authors: | SHI Xi-ju XIA Chun WANG Ming |
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| Institution: | SHI Xi-ju,XIA Chun,WANG Ming~* |
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