花生种子全长cDNA文库的构建和鉴定 |
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作者姓名: | 蔡宁波 黄湘文 庄伟建 |
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作者单位: | 福建农林大学油料作物研究所,福建,福州,350002;福建农林大学油料作物研究所,福建,福州,350002;福建农林大学油料作物研究所,福建,福州,350002 |
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摘 要: | 以花生品种闽花5号各发育时期的种子为材料分离mRNA,利用SMART技术合成双链cDNA。利用限制性内切酶SfiⅠ酶切。将经过分级分离得到的cDNA连接到质粒载体pDNR-LIB,成功构建花生种子全长cDNA文库。将所得到初级文库扩增后进行保存,检测扩增文库滴度为1.7×109cfu/mL。PCR鉴定重组子,发现重组率接近100%,插入片段集中分布在0.5~2.0 kb。插入片段的平均大小在1000 bp左右,这说明该文库既可以满足低丰度基因的筛选,也可保证获得全长cDNA。
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关 键 词: | 花生 种子 cDNA文库 SMART技术 |
文章编号: | 1002-4093(2007)02-0001-05 |
收稿时间: | 2007-04-12 |
修稿时间: | 2007-04-12 |
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