甘蓝自交不亲和相关转录因子BosiPA1 蛋白基因的克隆与表达分析 |
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引用本文: | 刘豫东,朱利泉,高启国,曾 静,张林成,任雪松,王小佳.甘蓝自交不亲和相关转录因子BosiPA1 蛋白基因的克隆与表达分析[J].园艺学报,2013,40(11):2161-2170. |
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作者姓名: | 刘豫东 朱利泉 高启国 曾 静 张林成 任雪松 王小佳 |
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作者单位: | 1 西南大学园艺园林学院 ,南方山地园艺学教育部重点实验室,重庆 400716;2 西南大学农学与生物科技学院,重庆 400716 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(30900986);重庆市自然科学基金项目(2009BB1298);西南大学博士基金项目(SWUB2008042);中央高校基本科研业务费专项资金项目(XDJK2010B010,XDJK2009C126) |
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摘 要: | 通过自交不亲和甘蓝‘A1’自花授粉1 h 和未授粉柱头蛋白质表达谱的对比,鉴定出1 个受
自花授粉诱导上调表达的蛋白,通过PCR 技术获取了其编码序列,命名为BosiPA1 蛋白,其基因全长为
3 730 bp,具有1 个1 092 bp 的完整编码框(KF314579)。BosiPA1 由6 个外显子、5 个内含子组成,编码
363 个氨基酸。序列分析表明BosiPA1 蛋白具有典型的basic helix-loop-helix(bHLH)功能域,在SCR、SRK、
Exo70A1 基因的ATG 上游启动子序列中存在可以被bHLH 功能区识别并结合的E-box(CANNTG)序列。
在分子进化上甘蓝BosiPA1与AtbHLH128 距离最近,与AtHEC1/2/3 和TgGBOF-1 处在同一个分支。RT-PCR
检测表明甘蓝BosiPA1 基因在花瓣、萼片、花粉、柱头和叶片中均有表达;荧光定量PCR 分析表明BosiPA1
基因在自花授粉10 min、30 min、1 h 的柱头中呈逐渐上升趋势。上述结果说明BosiPA1 与bHLH 的进化
分支较早,可能是一个参与甘蓝多器官发育的自交不亲和相关的转录因子。
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关 键 词: | 甘蓝 bHLH 转录因子 基因克隆 表达分析 |
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