| 中国被毛孢有性发育启动前后cDNA文库的构建 |
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| 引用本文： | 谢放,常黎明,李建宏,张育,张亚军,刘帅. 中国被毛孢有性发育启动前后cDNA文库的构建[J]. 浙江农业学报, 2016, 28(11): 1895. DOI: 10.3969/j.issn.1004-1524.2016.11.14 |
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| 作者姓名： | 谢放 常黎明 李建宏 张育 张亚军 刘帅 |
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| 作者单位： | 兰州交通大学 化学与生物工程学院,甘肃 兰州 730070 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(215069) |
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| 摘 要： | ![]()
构建了中国被毛孢有性发育启动前后的cDNA文库。采用Total RNA Kit Ⅰ法提取总RNA,磁珠法分离mRNA,反转录合成双链cDNA。获得的cDNA经蛋白酶K与SfiⅠ消化酶切并纯化,连接到载体pUC19上,采用电转化法将其转化到感受态细胞DH-5α中。之后测定文库的克隆数、重组率、插入片段大小。结果显示,文库1含1.09×106个重组体,蓝白斑实验显示重组率为92.5%;文库2含1.13×106个重组体,蓝白斑实验显示重组率为92%;两文库重组DNA片段的大小范围均在500~2 000 bp。说明本试验中所提取的 RNA 其纯度很好,完全可以达到后续研究的要求。
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| 关 键 词： | 中国被毛孢 有性发育 cDNA文库 |
| 收稿时间： | 2016-03-16 |
Construction of cDNA libraries from Hirsutella sinensis before and after sexual development |
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| XIE Fang,CHANG Li-ming,LI Jian-hong,ZHANG Yu,ZHANG Ya-jun,LIU Shuai. Construction of cDNA libraries from Hirsutella sinensis before and after sexual development[J]. Acta Agriculturae Zhejiangensis, 2016, 28(11): 1895. DOI: 10.3969/j.issn.1004-1524.2016.11.14 |
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| Authors: | XIE Fang CHANG Li-ming LI Jian-hong ZHANG Yu ZHANG Ya-jun LIU Shuai |
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| Affiliation: | School of Chemical and Biological Engineering, Lanzhou Jiaotong University, Lanzhou 730070, China |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | Hirsutella sinensis sexual development cDNA library |
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