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绵羊Myostatin基因5′调控区的生物信息学分析及孕激素对调控区活性的影响
引用本文:秦健,杜娟,杨亚群,杜荣. 绵羊Myostatin基因5′调控区的生物信息学分析及孕激素对调控区活性的影响[J]. 中国农业科学, 2012, 45(9): 1814-1825. DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.09.017
作者姓名:秦健  杜娟  杨亚群  杜荣
作者单位:1.山西农业大学动物科技学院2.山西农业大学信息科学与工程学院分析测试中心,山西太谷 030801
基金项目:国家自然科学基金项目(30771580、31140074);教育部科学技术研究重点项目(210027);山西省自然科学基金项目(2008011057-2);山西省高等学校优秀青年学术带头人支持计划;山西农业大学中青年拔尖创新人才支持计划
摘    要:【目的】克隆并分析绵羊Myostatin基因5′调控区,并在细胞水平研究孕激素对该调控区活性的影响。【方法】利用PCR方法扩增绵羊Myostatin基因5′调控区,采用MatInspector等软件分析并比较其和牛、猪调控区的调控元件和转录因子。以EGFP为报告基因,构建表达载体,转染C2C12细胞,同时添加不同剂量的孕激素(0、10、100和1 000 nmol•L-1),然后通过RT-PCR方法检测报告基因EGFP和内源性Myostatin的mRNA水平。【结果】获得绵羊约3.2 kb Myostatin基因5′调控区(MSTN5′regu),预测了两个对双肌性状可能存在贡献的位点。在绵羊、牛和猪的相应调控区发现了许多可能对该基因转录调控起重要作用的调控元件和相应转录因子,包括E-box、MEF2、MTATA、MTBF、HOMF、PRE、ARE和GRE等。各种元件在不同动物间基本都有,但具体的序列、位置以及数量有所差异。成功构建了绵羊pMSTN5′regu-EGFP表达载体,且转染后100 nmol•L-1孕激素明显抑制了内源性Myostatin mRNA和报告基因EGFP mRNA的表达。【结论】绵羊Myostatin基因的转录受多种转录因子和相应调控元件的调控,适量孕激素可通过下调Myostatin基因5′调控区的活性而抑制该基因的转录。

关 键 词:绵羊  Myostatin基因5&prime  调控区  生物信息学分析  调控元件  转录因子  孕激素  
收稿时间:2011-11-28

Bioinformatic Analysis of Myostatin Gene 5′ Regulatory Region from Sheep and Effect of Progesterone on the Activity of the Regulatory Region
QIN Jian , DU Juan , YANG Ya-qun , DU Rong. Bioinformatic Analysis of Myostatin Gene 5′ Regulatory Region from Sheep and Effect of Progesterone on the Activity of the Regulatory Region[J]. Scientia Agricultura Sinica, 2012, 45(9): 1814-1825. DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.09.017
Authors:QIN Jian    DU Juan    YANG Ya-qun    DU Rong
Affiliation:1 (1College of Animal Science and Technology,Shanxi Agricultural University,Taigu 030801,Shanxi;2College of Information Science and Engineering,Shanxi Agricultural University,Taigu 030801,Shanxi)
Abstract:
Keywords:
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