犬新孢子虫MAG1与IFN-γ融合基因重组真核质粒的真核共表达及免疫学评价 |
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引用本文: | 焦石,贾立军,张立霞,钱年超,刘明明,黄国明,张守发.犬新孢子虫MAG1与IFN-γ融合基因重组真核质粒的真核共表达及免疫学评价[J].中国预防兽医学报,2012,34(8):662-666. |
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作者姓名: | 焦石 贾立军 张立霞 钱年超 刘明明 黄国明 张守发 |
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作者单位: | 延边大学农学院动物医学系,吉林延吉,133002 |
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摘 要: | 为对犬孢子虫MAG1与IFN-γ融合基因重组真核质粒进行免疫学评价,本实验以含有MAG1-IFN-γ基因片段的克隆质粒为模板,扩增MAG1-IFN-γ目的片段,构建pVAX-MAG1-IFN-γ重组真核表达质粒,将其转染Vero细胞,采用间接免疫荧光(IFA)和western blot技术检测MAG1基因在Vero细胞中的表达,并免疫BALB/c小鼠,进行免疫学评价。结果表明,PCR扩增获得基因片段大小为1 536 bp,与GenBank中登录的MAG1和IFN-γ核苷酸序列的同源性为99%;IFA检测MAG1基因在Vero细胞中获得瞬时表达,转染的Vero细胞呈现特异性绿色荧光;western blot分析表达蛋白的分子量为57 ku,具有较好的反应原性。将构建的重组真核表达质粒免疫BALB/c小鼠,经间接ELISA和T淋巴细胞亚群含量测定表明,重组质粒具有较好的免疫原性。本实验为新孢子虫病核酸疫苗的深入研究奠定了基础。
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关 键 词: | 犬新孢子虫 MAG1-IFN-γ 真核共表达 |
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