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日本血吸虫Wnt受体蛋白SjFz5在不同发育阶段的组织定位及mRNA表达水平分析
引用本文:信彩岩,王孝波,冯新港,高阳,石耀军,杨健美,王立群,苑纯秀. 日本血吸虫Wnt受体蛋白SjFz5在不同发育阶段的组织定位及mRNA表达水平分析[J]. 中国预防兽医学报, 2012, 34(8): 591-596
作者姓名:信彩岩  王孝波  冯新港  高阳  石耀军  杨健美  王立群  苑纯秀
作者单位:1. 东北农业大学生命科学院,黑龙江哈尔滨150030;中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室,上海200241
2. 中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室,上海,200241
3. 东北农业大学生命科学院,黑龙江哈尔滨,150030
基金项目:国家自然科学基金资助项目,中央级公益性科研院所基本科研业务费专项
摘    要:为研究日本血吸虫(Sj)Wnt信号分子受体SjFz5(Frizzled5)在Sj生长发育中的作用,本实验对其在不同发育阶段的mRNA转录水平及组织分布进行了检测,并采用定量PCR方法比较SjFz5基因在Sj不同发育阶段间的mRNA水平差异。以7 d童虫cDNA为模板,扩增SjFz5基因编码胞外区CRD(Cystein rich domain)的基因片段,构建pET-SjFz5-CRD表达重组质粒进行原核表达。以纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,并进行SjFz5蛋白的组织定位。结果显示:SjFz5基因mRNA在发育早期表达水平相对较高,其中7 d童虫中表达量最高,13 d和18 d童虫下调了约1/3。23 d及其后雌雄虫的表达水平继续下调,雄虫下调比雌虫略显缓慢。整个成虫阶段SjFz5 mRNA维持在一个相对较低的水平。免疫组化结果显示SjFz5蛋白在虫体组织中分布广泛,其中雌雄虫生殖器官组织中的分布最为明显。随着卵巢和睾丸的逐步发育,SjFz5蛋白的量也呈现增加的趋势。SjFz5 mRNA在7 d童虫内表达量最高,SjFz5蛋白在雌雄生殖器官组织中分布最为明显,提示其介导的Wnt信号通路可能参与调节童虫阶段的细胞增殖、器官分化,并可能调节两性生殖细胞的发育。

关 键 词:日本血吸虫  Wnt  SjFz5  发育  免疫组化

mRNA expression level and localization of the SjFz5, the receptor of Wnt signal pathway in Schistosoma japonicum
XIN Cai-yan , WANG Xiao-bo , FENG Xing-gang , GAO Yang , SHI Yao-jun , YANG Jian-mei , WANG Li-qun , YUAN Chun-xiu. mRNA expression level and localization of the SjFz5, the receptor of Wnt signal pathway in Schistosoma japonicum[J]. Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine, 2012, 34(8): 591-596
Authors:XIN Cai-yan    WANG Xiao-bo    FENG Xing-gang    GAO Yang    SHI Yao-jun    YANG Jian-mei    WANG Li-qun    YUAN Chun-xiu
Affiliation:1.School of Life Science,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China;2.Key Laboratory of Animal Parasitology, Ministry of Agricultural,Shanghai Veterinary Research Institute,Shanghai 200241,China)
Abstract:
Keywords:Schistosoma japonicum  Wnt  SjFz5  development  immunohistochemical
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