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鸡PPAR-γ基因表达载体构建及抗血清制备
引用本文:王娉,王启贵,李辉,张富春.鸡PPAR-γ基因表达载体构建及抗血清制备[J].畜牧兽医学报,2007,38(7):651-656.
作者姓名:王娉  王启贵  李辉  张富春
作者单位:1. 新疆大学生命科学与技术学院,新疆生物资源基因工程重点实验室,乌鲁木齐830046
2. 新疆大学生命科学与技术学院,新疆生物资源基因工程重点实验室,乌鲁木齐830046;东北农业大学动物科学技术学院,哈尔滨,150030
3. 东北农业大学动物科学技术学院,哈尔滨,150030
基金项目:中国博士后科学基金(2005037018);新疆生物资源基因工程重点实验室开放基金(2005XJDX004)
摘    要:为构建鸡PPAR-γ基因的原核和真核表达载体并制备鸡PPAR-γ的抗血清,根据鸡PPAR-γ基因cDNA序列设计一对引物,采用RT-PCR的方法扩增鸡PPAR-γ基因的cDNA片段并将其分别插入到原核表达载体pGEX-4T-1和真核表达载体pcDNA3中;进而诱导重组原核表达载体pGEX-4T-1/PPAR-γ在大肠杆菌BL21中表达;同时利用重组真核表达载体pcDNA3/PPAR-γ免疫注射小鼠使其产生免疫应答。SDS-PAGE结果显示pGEX-4T-1/PPAR-γ在大肠杆菌BL21中得到了高效的表达。ELISA和Western blot结果表明,pcDNA3/PPAR-γ免疫小鼠产生了效价较高和特异性较强的抗体。本研究所构建的真核表达载体pcDNA3/PPAR-γ为在细胞水平上研究鸡PPAR-γ基因超表达提供了有力的工具;所获得的重组蛋白和抗血清为在蛋白水平上研究鸡PPAR-γ基因的功能奠定了基础。

关 键 词:  PPAR-γ基因  载体构建  抗血清
文章编号:0366-6964(2007)07-0651-06
修稿时间:2006-06-29

Construction of Expression Vector of Chicken Peroxisome Proliferator-Activated Receptor-Gamma Gene and the Preparation of Its Antiserum
WANG Ping,WANG Qi-gui,LI Hui,ZHANG Fu-chun.Construction of Expression Vector of Chicken Peroxisome Proliferator-Activated Receptor-Gamma Gene and the Preparation of Its Antiserum[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2007,38(7):651-656.
Authors:WANG Ping  WANG Qi-gui  LI Hui  ZHANG Fu-chun
Institution:1. Xinjiang Key Laboratory of Biological Resources and Genetic Engineering, College of Life Science and Technology, Xinjiang University, 830046, China ; 2. College of Animal Science and Technology, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China
Abstract:
Keywords:
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