猪伪狂犬病病毒和猪圆环病毒3型双重SYBR GreenⅠ 荧光定量PCR方法的建立

为了同时检测猪伪狂犬病病毒（PRV）野毒和猪圆环病毒3型（PCV3），基于PRV gE基因和PCV3 Rep基因保守序列各合成了1对引物，在优化反应体系和扩增条件的基础上，建立了检测PRV和PCV3的双重SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR方法。结果显示：PRV和PCV3的Tm值分别为87和81.5 ℃，能特异地检测PRV和PCV3，而对其他5种猪病原均未检测到荧光信号；PRV和PCV3的最低检测值分别为37.0和33.8 copies·μL^-1；批内批间变异系数均小于2%；对2017—2019年期间采自河南地区的78份猪临床样品进行检测，PRV和PCV3的阳性率分别为19.23%（15/78）和41.03%（32/78），二者混合感染的阳性率为8.97%（7/78）。表明该方法具有高度的敏感性、特异性和稳定性，可用于监测PRV野毒和PCV3及其流行病学调查。