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鸭黄病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用
引用本文:高凤,于可响,马秀丽,李玉峰,王友令,李建亮,崔言顺.鸭黄病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用[J].中国兽医学报,2013,33(1):16-19.
作者姓名:高凤  于可响  马秀丽  李玉峰  王友令  李建亮  崔言顺
作者单位:1. 山东农业大学动物科技学院,山东泰安,271018
2. 山东省农业科学院家禽研究所,山东济南,250023
3. 山东省农业科学院家禽研究所,山东济南250023;华南农业大学动物医学院,广东广州510642
摘    要:根据鸭黄病毒E蛋白基因序列设计了1对特异性引物和TaqMan探针,建立了实时荧光定量RT-PCR检测鸭黄病毒的方法.根据舍鸭黄病毒目的扩增片段的质粒拷贝数与定量反应Ct值的关系,绘制了标准曲线(y=-3.39 X+43.18,r=0.973).该方法具有特异性,对鸭病毒性肝炎病毒、禽流感病毒、新城疫病毒、腺病毒、鸭瘟病毒、猪乙脑病毒的核酸都没有扩增反应.敏感性试验显示,建立的此方法最低可检出1.9个TCID50病毒核酸.该方法对5只健康雏鸭人工感染86 h后的组织器官样品(盲肠扁桃体除外)的检测结果均为阳性,与病毒分离鉴定的阳性符合率为100%.结果表明,该方法真实可靠,而且从核酸提取到报告检测结果耗时不超过3h,为鸭黄病毒病提供了一种敏感特异的定量检测方法.

关 键 词:鸭黄病毒  实时荧光定量RT-PCR  TaqMan探针

Development and application of real-time RT-PCR assay for duck flavivirus
GAO Feng,YU Ke-xiang,MA Xiu-li,LI Yu-feng,WANG You-ling,LI Jian-liang,CUI Yan-shun.Development and application of real-time RT-PCR assay for duck flavivirus[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2013,33(1):16-19.
Authors:GAO Feng  YU Ke-xiang  MA Xiu-li  LI Yu-feng  WANG You-ling  LI Jian-liang  CUI Yan-shun
Institution:1*(1.College of Animal Science and Technology,Shandong Agricultural University,Tai’an,Shandong 271018,China;2.Immunology of Institute of Poultry Science,Shandong Academy of Agricultural Science,Jinan 250023,China;3.College of Veterinary Medicine,Huanan Agricultural University,Guangzhou 510642,China)
Abstract:
Keywords:
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