| 日本血吸虫β-catenin基因的克隆及在不同发育阶段的表达水平 |
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| 引用本文： | 李红飞,王孝波,冯新港.日本血吸虫β-catenin基因的克隆及在不同发育阶段的表达水平[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2011,39(2):33-41. |
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| 作者姓名： | 李红飞 王孝波 冯新港 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学 动物医学院；中国农业科学院 上海兽医研究所;中国农业科学院 上海兽医研究所;中国农业科学院 上海兽医研究所 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30600450)；国家重点基础研究发展规划(“973”计划)项目(2007CB513108)；中央级公益性科研院所基本科研业务费项目(2008JB02，2010JB07) |
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| 摘 要： | 【目的】分析β-连环蛋白(β-catenin)在不同发育阶段日本血吸虫体内的表达特征,为研究Wnt/β-catenin信号通路对虫体发育的调控奠定基础。【方法】以7 d童虫cDNA为模板,通过RACE技术获得日本血吸虫β-catenin基因全长cDNA序列。采用实时定量PCR分析该基因mRNA在不同发育阶段日本血吸虫体内表达水平的变化。以含有多个抗原表位的β-catenin部分cDNA序列为模板,构建原核pET28a-β-catenin-310重组质粒,表达β-catenin蛋白。以纯化的原核表达产物为抗原,免疫BALB/c小鼠制备抗血清,以此抗血清为一抗,通过Westernblotting分析β-catenin蛋白在不同发育阶段日本血吸虫体内表达量的变化。【结果】β-catenincDNA(GenBank登陆号GU570442)序列全长2 354 bp,含完整的开放阅读框,编码671个氨基酸。β-catenin基因mRNA表达水平在虫卵中最高,23 d雌虫次之,在13 d童虫和23 d雄虫中也较高,约是23 d雌虫的一半,在其他发育阶段mRNA的表达水平相对较低。构建的重组质粒以包涵体形式表达β-catenin重组蛋白,该蛋白有很好的免疫原性。在日本血吸虫不同发育阶段β-catenin蛋白表达量的变化趋势与β-cateninmRNA表达水平的变化基本一致。【结论】不同发育阶段日本血吸虫β-catenin基因mRNA表达水平与β-catenin蛋白表达水平变化趋势基本一致;结合日本血吸虫发育特征,推测Wnt/β-catenin信号通路可能对虫体的器官分化、虫卵的形成及卵胚发育等过程起着重要的调控作用。
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| 关 键 词： | 日本血吸虫 β-catenin基因 克隆表达 Wnt信号通路 |
| 收稿时间： | 2010/7/13 0:00:00 |
Cloning of β-cateningene from Schistosoma japonicum and its stage-specific mRNA and protein level expression |
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| LI Hong-fei,WANG Xiao-bo,FENG Xin-gang,JIN Ya-ping,YANG Jian-mei,YUAN Chun-xiu,LIN Jiao-jiao.Cloning of β-cateningene from Schistosoma japonicum and its stage-specific mRNA and protein level expression[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2011,39(2):33-41. |
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| Authors: | LI Hong-fei WANG Xiao-bo FENG Xin-gang JIN Ya-ping YANG Jian-mei YUAN Chun-xiu LIN Jiao-jiao |
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| Institution: | LI Hong-fei1,2,WANG Xiao-bo2,FENG Xin-gang2,JIN Ya-ping1,YANG Jian-mei2,YUAN Chun-xiu2,LIN Jiao-jiao2 (1 College of Veterinary Medicine,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China,2 Key Laboratory of Animal Parasitology,Ministry of Agriculture,Shanghai Veterinary Research Institute,Chinese Academy ofAgricultural Science,Shanghai 200241,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | |
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