| 荧光假单胞菌7-14flhA基因的克隆与功能的初步分析 |
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| 引用本文： | 康越景,钱国良,丁运昭,范加勤,胡白石,刘凤权.荧光假单胞菌7-14flhA基因的克隆与功能的初步分析[J].江苏农业学报,2011,27(2). |
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| 作者姓名： | 康越景 钱国良 丁运昭 范加勤 胡白石 刘凤权 |
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| 作者单位： | 1. 南京农业大学植物保护学院,农业部病虫监测与治理重点开放实验室,江苏,南京,210095
2. 南京出入境检验检疫局,南京中健卫生实业有限公司,江苏,南京,210008 |
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| 基金项目： | 公益性行业(农业)科研专项，国家"863"计划 |
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| 摘 要： | 为了探索flhA基因在荧光假单胞菌7-14(Pf7-14)鞭毛合成的作用,以铜绿假单胞菌UCBPP-PA14的鞭毛蛋白FlhA(NC_008463.1)为诱饵,在荧光假单胞菌Pf-5(NC_004129)、Pf0-1(NC_007492)和SBW25(NC_012660)的伞基因组中进行BLASTP比对分析,结果在Pf-5、Pf0-1和SBW25的全基因组搜索到flhA的同系物,分别命名为flhAPf-5、flhAPf0-1,和flhASBW25.根据三者的核酸序列,设计简并引物flhA-F/flhA-R,以荧光假单胞菌7-14(Pf7-14)基凶组DNA为模板进行PCR扩增,并对得到的片段测序比对,发现该片段2 130 bp为一完整的开放阅读框,命名为flhAPf7-14.flhAPf7-14在氨基酸水平上与flhAPf-5和flhAPf0-1的同源性分别达到93%和94%.Southern杂交证明flhA 在Pf7-14基因组中为单一拷贝.通过同源重组单交换的方式构建了Pf7-14flhA基因插入失活突变株,结果表明flhA突变体缺失了鞭毛装置并丧失了游动性,而互补菌株则恢复了鞭毛合成能力和游动能力.本研究为今后进一步研究Pf7-14鞭毛合成、菌体游动性与该菌定殖能力及生防能力的关系奠定基础.
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| 关 键 词： | 荧光假单胞菌 flhA基因 鞭毛合成 游动性 |
Cloning and primary analysis of flhA gene function of Pseudomonas fluorescens strain 7-14 |
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| KANG Yue-jing,QIAN Guo-liang,DING Yun-zhao,FAN Jia-qin,HU Bai-shi,LIU Feng-quan.Cloning and primary analysis of flhA gene function of Pseudomonas fluorescens strain 7-14[J].Jiangsu Journal of Agricultural Sciences,2011,27(2). |
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| Authors: | KANG Yue-jing QIAN Guo-liang DING Yun-zhao FAN Jia-qin HU Bai-shi LIU Feng-quan |
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