鹅新城疫病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立 |
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引用本文: | 刘文俊,黄运茂,阳佑天,许丹宁,曹楠,周德荣,田允波.鹅新城疫病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立[J].中国畜牧兽医,2018(1). |
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作者姓名: | 刘文俊 黄运茂 阳佑天 许丹宁 曹楠 周德荣 田允波 |
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作者单位: | 仲恺农业工程学院广东省水禽健康养殖重点实验室;佛山科学技术学院; |
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摘 要: | 本研究拟建立一种能在基层实时、便捷诊断鹅新城疫病毒(goose Newcastle disease virus,GNDV)的检测方法。根据GenBank中公布的GNDVF基因的高度同源保守序列设计特异性引物,并在反应体系中添加钙黄绿素/氯化锰指示剂,建立可视化RT-LAMP检测方法。结果显示,建立的方法能特异地检测出GNDV及NDV Lasota疫苗株,而小鹅瘟病毒(GPV)、禽流感病毒(AIV)、鸭坦布苏病毒(DTMUV)等其他病毒均为阴性。所建立的GNDV可视化RT-LAMP检测方法对RNA的最低检测限为10pg,反应过程不需PCR仪等复杂的仪器,50min即可完成反应,可经肉眼观察反应体系颜色判定结果。该方法特异性强、灵敏度高,且操作安全、简便、快捷,可满足基层筛查GNDV的需求。
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