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| 利用NusA促溶标签原核表达Butelase 1蛋白 | |
| 作者单位： | ;1.河南农业大学农业部动物生化与营养重点开放实验室;2.河南省洛阳市疾病预防控制中心 |
| 摘 要： | 为获得可溶性Butelase 1蛋白,将Butelase 1基因插入到带有NusA促溶标签的原核表达载体上,将重组质粒转化至大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3)感受态细胞中进行诱导表达,用Ni-NTA亲和层析法纯化表达的可溶性蛋白,用SDS-PAGE和Western blot分析蛋白的表达情况。酶切和测序结果证实p ET21b-His6-NusA-Butelase 1原核表达载体构建成功。SDS-PAGE分析结果表明诱导后表达的融合蛋白大小为94.9 k D,主要为可溶性表达,部分为包涵体表达。Western blot检测结果显示,纯化得到的His6-NusA-Butelase 1融合蛋白用抗His6-Tag抗体鉴定时为特异性表达。 |
| 关 键 词： | Butelase 1 促溶标签 NusA 表达分析 |
Prokaryotic Expression of Protein Butelase 1 through Solubility-enhancing Tag NusA |
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