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重组小麦组蛋白H4介导绿色荧光蛋白基因(pEGFP/C1)的转染
引用本文:王春艳,郑梅竹,时东方,郑伟,吴山力,孙号然,张玉静.重组小麦组蛋白H4介导绿色荧光蛋白基因(pEGFP/C1)的转染[J].广东农业科学,2010,37(5):1-3.
作者姓名:王春艳  郑梅竹  时东方  郑伟  吴山力  孙号然  张玉静
作者单位:1. 吉林大学畜牧兽医学院,吉林长春,130062
2. 吉林大学畜牧兽医学院,吉林长春,130062;长春师范学院中心实验室,吉林长春,130032
3. 长春师范学院中心实验室,吉林长春,130032
基金项目:国家自然科学基金项目 
摘    要:利用在大肠杆菌体内表达的重组小麦组蛋白H4与质粒DNA形成复合体后,通过琼脂糖凝胶电泳迁移试验(EMSA)验证重组蛋白与DNA的结合情况;MTT法检测蛋白对细胞的毒性作用;转染细胞后,激光共聚焦显微镜检测荧光蛋白的表达。此重组蛋白能很好地结合质粒DNA,且能有效地保护DNA分子不受核酸酶降解,并能高效地携带绿色荧光蛋白基因pEGFP/C1转染进入卵巢癌细胞株H08910。

关 键 词:基因转移  重组小麦组蛋白H4  转染  非病毒载体  绿色荧光蛋白

Recombinant wheat histone H4-mediated green fluorescent protein gene (pEGFP/C1) transfection
WANG Chun-yan,ZHENG Mei-zhu,SHI Dong-fang,ZHENG Wei,WU Shan-li,SUN Hao-ran,ZHANG Yu-jing.Recombinant wheat histone H4-mediated green fluorescent protein gene (pEGFP/C1) transfection[J].Guangdong Agricultural Sciences,2010,37(5):1-3.
Authors:WANG Chun-yan  ZHENG Mei-zhu  SHI Dong-fang  ZHENG Wei  WU Shan-li  SUN Hao-ran  ZHANG Yu-jing
Institution:WANG Chun-yan1,ZHENG Mei-zhu1,2,SHI Dong-fang2,ZHENG Wei1,WU Shan-li1,SUN Hao-ran1,ZHANG Yu-jing1 (1.College of Animal Science and Veterinary Medicine,Jilin University,Changchun 130062,China,2. Central Laboratory,Changchun Normal University,Changchun 130032,China)
Abstract:Recombinant wheat hisone H4 was expressed in E.Coli. Purified protein binded plasmid DNA using gel electrophoresis mobility shift assay (EMSA).Cell proliferation was measured with MTT assay.Green fluorescent protein was measured using a confocal microscope.This recombinant wheat histone H4 could bind plasmid DNA efficiently and protect the DNA from DNase I.Plasmid pEGFP/C1 was transfected into ovarian cancer cells HO8910 and obtained expression with high efficacy.
Keywords:gene delivery  recombinant wheat histone H4  transfection  non-viral vector  green fluorescent protein  
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