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| 烟草青枯病菌巢式PCR检测方法的建立及应用 | |
| 引用本文： | 李本金,谢世勇,刘裴清,谢廷鑫,陈庆河,翁启勇. 烟草青枯病菌巢式PCR检测方法的建立及应用[J]. 热带作物学报, 2014, 35(11): 2230-2235 |
| 作者姓名： | 李本金 谢世勇 刘裴清 谢廷鑫 陈庆河 翁启勇 |
| 作者单位： | 1. 福建省农业科学院植物保护研究所,福建福州,350013 2. 福建省烟草公司南平市公司,福建南平,353000 |
| 基金项目： | 福建省烟草公司南平市公司烟草农业科技项目（No. NYK2013-13-3）；福建省农业科学院科技重大专项（No. ZDZX-1302）；福建省农业科学院科技创新团队建设基金（No. STIF-Y07）。 |
| 摘 要： | 利用细菌16S-23S r DNA内源转录间隔区通用引物L1/L2扩增烟草青枯病菌基因组DNA,并对其扩增产物进行克隆测序,经与近缘种序列多重比对分析后,设计1对特异性引物Rs F/Rs R,用于包括烟草青枯病菌在内的15种不同细菌、5种真菌、3种卵菌基因组DNA的PCR扩增。结果表明:在优化的反应体系与程序条件下,该对引物只能从烟草青枯病菌中扩增出241 bp的特异片段,并通过序列测定验证了其准确性;将引物Rs F/Rs R与细菌通用引物L1/L2进行巢式PCR扩增后,其检测灵敏度在DNA水平上可达0.4 fg/μL,较常规PCR提高1 000倍,表明该对引物能有效地用于烟草组织及土壤中青枯病菌的检测。此结果对烟草青枯病的早期诊断、快速检测及病害流行学研究具有重要意义。 |
| 关 键 词： | 烟草 青枯病菌 巢式PCR 分子检测 |
Development and Application of Nested PCR Assays for Detection of Ralstonia solanacearum in Tobacco |
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| LI Benjin,XIE Shiyong,LIU Peiqing,XIE Tingxin,CHEN Qinghe and WENG Qiyong. Development and Application of Nested PCR Assays for Detection of Ralstonia solanacearum in Tobacco[J]. Chinese Journal of Tropical Crops, 2014, 35(11): 2230-2235 | |
| Authors: | LI Benjin XIE Shiyong LIU Peiqing XIE Tingxin CHEN Qinghe WENG Qiyong |
| Affiliation: | Institute of Plant Protection, Fujian Academy of Agricultural Sciences;Nanping Branch of Fujian Tobacco Company;Institute of Plant Protection, Fujian Academy of Agricultural Sciences;Institute of Plant Protection, Fujian Academy of Agricultural Sciences;Institute of Plant Protection, Fujian Academy of Agricultural Sciences;Institute of Plant Protection, Fujian Academy of Agricultural Sciences |
| Abstract: | |
| Keywords: | Tobacco Ralstonia solanacearum Nested-PCR Molecular detection |
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