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aFGF植物表达载体构建及转化紫花苜蓿的初步研究
作者姓名:蒋世翠  王义  孙春玉  王艳芳  李校堃  张美萍
作者单位:1.吉林农业大学生命科学学院,吉林 长春 130118;2.国家教育部生物反应器工程中心,吉林 长春 130118
基金项目:十一五“863”计划生物反应器重大专项(No.2007AA100503);吉林省科技发展重点计划(No.20070922);高等学校科技创新工程重大项目培育资金(No.70S018)资助
摘    要:主要将aFGF基因按照植物偏爱的密码子进行基因优化,同时加上信号肽、6-组氨酸标签及凝血酶切割因子,合成全基因,再将基因插入到改造的TΩ4AB质粒中,将aFGF基因和质粒上的增强子、启动子、Ω序列及ployA加尾序列双酶切,命名为TΩ4AB-aF,将TΩ4AB-aF插入到pBI121载体中命名为pBI121-TΩ4AB-aF。利用三亲融合法将pBI121-TΩ4AB-aF转入到农杆菌菌株LBA4404中,转化苜蓿。转基因苗用卡那霉素进行筛选;并对抗性苗进行PCR、RT-PCR、Western Blot检测。结果表明,aFGF在苜蓿中得到表达。为苜蓿作为植物生物反应器奠定理论基础。

关 键 词:aFGF  植物生物反应器  紫花苜蓿
收稿时间:2010-05-30
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