| 犬圆环病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 孙文超,解长占,赵冠宇,曹亮,郑敏,曹慧慧,张红云,韦显凯,韩继成,温树波,肖朋朋,靖杰,张萍,鲁会军,金宁一. 犬圆环病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 动物医学进展, 2017, 38(5) |
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| 作者姓名： | 孙文超 解长占 赵冠宇 曹亮 郑敏 曹慧慧 张红云 韦显凯 韩继成 温树波 肖朋朋 靖杰 张萍 鲁会军 金宁一 |
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| 作者单位： | 1. 广西大学动物科技学院,广西南宁53001;军事医学科学院军事兽医研究所,吉林长春130122;2. 军事医学科学院军事兽医研究所,吉林长春,130122;3. 广西动物疫病预防控制中心,广西南宁,530001;4. 广西大学动物科技学院,广西南宁53001;广西动物疫病预防控制中心,广西南宁530001;5. 广西玉林市动物疫病预防控制中心,广西玉林,537000 |
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| 摘 要： | 犬圆环病毒(DogCV)是圆环病毒科新发现的圆环病毒,旨在建立犬圆环病毒实时荧光定量PCR检测方法。试验用PCR方法克隆犬圆环病毒ORF2基因保守区域,构建标准阳性质粒pClon007-ORF2。以标准阳性质粒pClon007-ORF2为模板对荧光定量PCR反应体系进行优化。结果表明,所建立的方法 Ct值与标准品在4.67×10~9 copies/μL~4.67×10~3 copies/μL范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.998,斜率为-3.445。该方法检测灵敏度为4.67×10~1copies/μL。该方法对狂犬病病毒、犬细小病毒、犬瘟热病毒、犬副流感病毒、犬腺病毒2型等犬常见病原的检测均无交叉反应;所有稀释度标准品模板均在83.35℃出现窄的特异性熔解峰。临床样品检测表明,所建立的实时荧光定量PCR对犬圆环病毒的阳性检测率为12.50%(4/32)。
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| 关 键 词： | 犬圆环病毒 SYBR GreenⅠ 实时荧光定量PCR |
Development of a Real-time PCR Method for Detection of Dog Circovirus |
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| SUN Wen-chao,XIE Chang-zhan,ZHAO Guang-yu,CAO Liang,ZHENG Min,CAO Hui-hui,ZHANG Hon-gyun,WEI Xian-kai,HAN Jic-heng,WEN Shu-bo,XIAO Peng-peng,JIN Jie,ZHANG Ping,LU Hui-jun,JIN Ning-yi. Development of a Real-time PCR Method for Detection of Dog Circovirus[J]. Progress In Veterinary Medicine, 2017, 38(5) |
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| Authors: | SUN Wen-chao XIE Chang-zhan ZHAO Guang-yu CAO Liang ZHENG Min CAO Hui-hui ZHANG Hon-gyun WEI Xian-kai HAN Jic-heng WEN Shu-bo XIAO Peng-peng JIN Jie ZHANG Ping LU Hui-jun JIN Ning-yi |
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