| 虾肝肠胞虫(EHP)孢子的纯化和计数 |
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| 引用本文： | 赵若恒,高雯,邱亮,李晨,谢国驷,黄倢.虾肝肠胞虫(EHP)孢子的纯化和计数[J].河北渔业,2019(1):16-20. |
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| 作者姓名： | 赵若恒 高雯 邱亮 李晨 谢国驷 黄倢 |
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| 作者单位： | 大连海洋大学水产与生命学院,辽宁大连116023;中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛海洋科学与技术国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程实验室农业与农村部海水养殖病害防治重点实验室青岛市海水养殖流行病学与生物安保重点实验室,山东青岛266071;中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛海洋科学与技术国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程实验室农业与农村部海水养殖病害防治重点实验室青岛市海水养殖流行病学与生物安保重点实验室,山东青岛266071;上海海洋大学,上海201306;中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛海洋科学与技术国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程实验室农业与农村部海水养殖病害防治重点实验室青岛市海水养殖流行病学与生物安保重点实验室,山东青岛,266071;中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛海洋科学与技术国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程实验室农业与农村部海水养殖病害防治重点实验室青岛市海水养殖流行病学与生物安保重点实验室,山东青岛266071;大连海洋大学水产与生命学院,辽宁大连116023;上海海洋大学,上海201306 |
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| 基金项目： | 中国-东盟海上合作基金项目;现代农业产业技术体系项目;主任基金 |
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| 摘 要： | 采用差速离心和密度梯度离心,从感染虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)对虾的肝胰腺中,尝试纯化出孢子,并应用透射电镜、荧光桃红染色和血球计数板计数的方法对纯化出的孢子进行了观察和计数。结果表明,从1g的EHP载量为(4.7±2.2)×104 copies/ng DNA的肝胰腺组织中经差速离心和密度梯度离心方法分离到EHP的孢子,电镜观察孢子为大小在0.7～1.2μm的椭圆形,纯化孢子悬液用血球计数板计数显示孢子浓度为5.30×103个/μL,蔗糖密度梯度中的纯化孢子区带含有的孢子总数约1.06×106个。
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| 关 键 词： | 虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei EHP) 纯化 计数 |
Purification and counting of Enterocytozoon hepatopenaei(EHP)spores |
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| ZHAO Ruo-heng,GAO Wen,QIU Liang,LI Chen,XIE Guo-si,HUANG.Purification and counting of Enterocytozoon hepatopenaei(EHP)spores[J].Hebei Fisheries,2019(1):16-20. |
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| Authors: | ZHAO Ruo-heng GAO Wen QIU Liang LI Chen XIE Guo-si HUANG |
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| Institution: | (Yellow Sea Fisheries Research Institute,Chinese Academy of Fishery Sciences,Qingdao 266071;Laboratory for Marine Fisheries Science and Food Production Processes,Qingdao National Laboratory for Marine Science and Technology;College of Fisheries and Life Science,Shanghai Ocean University,Shanghai 201306) |
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| Abstract: | Enterocytozoon hepatopenaei(EHP)spores were purified from total 1g hepatopancreas tissues with an average EHP loading at(4.7±2.2)×10^4copies/ng DNA by differential centrifugation and density gradient centrifugation.The purified spores were observed under transmission electron microscope,and counted with phloxine staining on a blood counting chamber under light microscope.Purified spores of EHP were observed under the electron microscope as ellipsoid at size of 0.7~1.2μm.The concentration of EHP spores in the suspension of purified EHP spores was counted as 5.30×10^3/μL by blood counting chamber.The total number of purified EHP spores in the band of sucrose gradients was estimated as 1.06×10^6. |
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| Keywords: | Enterocytozoon hepatopenaei(EHP) purification quantification |
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