菌渣蛋白肽的制备及其抗氧化肽的分离鉴定

以发酵菌渣(糠)为原料制备活性肽,选用纤维素酶、食用菌酶A02和酵母抽提酶水解发酵菌糠,酶解液经浓缩冷冻干燥后制成蛋白肽粉,以DPPH抗氧化性为指标,经Sephadex G-25凝胶层析和RP-HPLC进行分离纯化,DPPH清除率最高的采用液质联用鉴定结构组成。试验结果表明,酶解最适条件为纤维素酶,酶解温度50℃,p H 4.8,酶的添加量0.7%,酶解时间60 min;食用菌酶A02和酵母抽提酶的最佳酶解工艺为温度55℃、p H6.5、酶解时间240 min,酶量分别添加0.5%和1%;获得的肽粉多肽含量达67%,其中分子量小于2000 Da的占95.74%。经Sephadex G-25凝胶柱脱盐和制备型RP-HPLC分离纯化,得到DPPH清除率最高为45.73%的组分,经液质联用鉴定该组分含有相对分子质量为475.2 Da,氨基酸序列为GluSer-Ala-Gly-Leu的肽段。