猪链球菌2型核糖核酸酶Ⅲ的克隆表达及催化特性分析 |
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引用本文: | 孙文,张永毅,陆畅,朱德文,尹媛媛,徐泉明,陈叶.猪链球菌2型核糖核酸酶Ⅲ的克隆表达及催化特性分析[J].畜牧与兽医,2024(1):46-55. |
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作者姓名: | 孙文 张永毅 陆畅 朱德文 尹媛媛 徐泉明 陈叶 |
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作者单位: | 1. 福建农林大学动物科学学院(蜂学学院),闽台动物病原生物学福建省高校重点实验室;2. 福建警察学院 |
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基金项目: | 福建省自然科学基金项目(2023J01272); |
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摘 要: | 为了研究猪链球菌2型(SS2)核糖核酸酶Ⅲ(RNaseⅢ)的催化特性,利用大肠杆菌BL21(DE3)异源表达猪链球菌2型RNaseⅢ(SS-RNaseⅢ)并通过镍柱亲和层析的方法分离纯化。异源表达研究显示,重组蛋白RNaseⅢ大部分为可溶性表达;催化特性研究显示,RNaseⅢ主要依赖Mg2+或Mn2+发挥催化功能,并在不同离子浓度和pH值环境下具有不同的催化活性;底物特异性研究显示,RNaseⅢ特异性切割长度为30 bp的双链RNA,同时对内源性的rnc mRNA和5S rRNA具有良好的特异性。上述结果表明,相较于其他细菌RNaseⅢ,SS-RNaseⅢ具有独特的催化特性,为深入理解RNaseⅢ如何介导SS2致病机制奠定了基础。
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关 键 词: | 猪链球菌2型 核糖核酸酶Ⅲ 原核表达 催化特性 |
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