| 结球甘蓝雌蕊调控转录因子SPT 基因的克隆
与序列分析 |
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| 引用本文： | 杨朴丽,许俊强,刘智宇,王志敏,张丹华,汤青林,宋 明.结球甘蓝雌蕊调控转录因子SPT 基因的克隆
与序列分析[J].中国蔬菜,2013,1(20):24-31. |
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| 作者姓名： | 杨朴丽 许俊强 刘智宇 王志敏 张丹华 汤青林 宋 明 |
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| 作者单位： | 西南大学园艺园林学院，南方山地园艺学教育部重点实验室，重庆市蔬菜学重点实验室，重庆;
400715 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划项目（2012CB113900），国家自然科学基金项目（31000908），重庆市自然科学基金项目
（2011BA1002），中央高校基本科研业务费专项（XDJK2012B020），国家大学生创新项目（201210635045） |
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| 摘 要： | 以结球甘蓝E1 为材料，提取花蕾总RNA，反转录cDNA。根据拟南芥SPT 基因设计引物，
采用同源克隆的方法从中克隆SPT 基因序列1 085 bp，开放阅读框1 062 bp。通过cDNA 推导得到的氨
基酸序列分析表明，BoSPT 编码353 个氨基酸残基，预测分子量为37.67 kD，pI 为6.83。经过EcoRⅠ和
KpnⅠ限制酶双酶切后，构建原核表达质粒pET43.1a-BoSPT 转化表达菌株E. coli Rosetta（ DE3），通过
SDS-PAGE 检测该蛋白的表达。经Smart-embl 预测其具有bHLH 家族结构域，位于序列第173～221 位氨
基酸残基处。进化树表明结球甘蓝BoSPT 与拟南芥AtSPT 和筷子芥AlSPT 的亲缘关系较近。BoSPT 基因
的原核表达得到纯化的融合蛋白。
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| 关 键 词： | 结球甘蓝 雌蕊 SPT 基因克隆 序列分析 |
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