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稻瘟菌胞外蛋白的提取及电泳方法初探
引用本文:常明,苏源,蔡永占,孔垂思,仓晓燕,杨静,刘林,朱有勇,李成云. 稻瘟菌胞外蛋白的提取及电泳方法初探[J]. 云南农业大学学报(自然科学版), 2009, 24(5)
作者姓名:常明  苏源  蔡永占  孔垂思  仓晓燕  杨静  刘林  朱有勇  李成云
作者单位:云南农业大学,农业生物多样性与病虫害控制教育部重点实验室,云南,昆明,650201 
基金项目:国家"973"项目,国家自然科学基金资助 
摘    要:
利用蛋白质组学研究方法对稻瘟菌的胞外蛋白进行分析,可以更好地了解该病原菌的生物学特性和致病机制.蛋白质样品制备和双向电泳,都是蛋白质组学研究的基础.采用冷冻干燥,透析结合法与三氯乙酸-脱氧胆酸钠沉淀法(TCA-DOC沉淀法)提取液体培养稻瘟菌得到的胞外蛋白,利用17 cm pH 3.0~10.0与17 cm pH 4.0~7.0两种pH梯度IPG胶条对同一样品进行第一向等电聚焦,12%SDS-PAGE凝胶进行第二向电泳,银染后用PDQuest软件(V7.4)对电泳图谱进行分析.结果表明,在上述两种提取稻瘟菌胞外蛋白的方法中,TCA-DOC沉淀法具有较好的提取效果,应用该实验方法得到的蛋白质分布在pH 4.0~7.0之间的点数达到621个,因此在双向电泳中,采用pH 4.0~7.0的胶条具有较好的分辨率.

关 键 词:稻瘟菌  胞外蛋白  提取  双向电泳

Study on Extracting and 2-D Electrophoresis of Extracellular Protein in Magnaporthe grisea
Abstract:
Keywords:
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