稻瘟菌胞外蛋白的提取及电泳方法初探 |
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引用本文: | 常明,苏源,蔡永占,孔垂思,仓晓燕,杨静,刘林,朱有勇,李成云. 稻瘟菌胞外蛋白的提取及电泳方法初探[J]. 云南农业大学学报(自然科学版), 2009, 24(5) |
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作者姓名: | 常明 苏源 蔡永占 孔垂思 仓晓燕 杨静 刘林 朱有勇 李成云 |
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作者单位: | 云南农业大学,农业生物多样性与病虫害控制教育部重点实验室,云南,昆明,650201 |
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基金项目: | 国家"973"项目,国家自然科学基金资助 |
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摘 要: | ![]() 利用蛋白质组学研究方法对稻瘟菌的胞外蛋白进行分析,可以更好地了解该病原菌的生物学特性和致病机制.蛋白质样品制备和双向电泳,都是蛋白质组学研究的基础.采用冷冻干燥,透析结合法与三氯乙酸-脱氧胆酸钠沉淀法(TCA-DOC沉淀法)提取液体培养稻瘟菌得到的胞外蛋白,利用17 cm pH 3.0~10.0与17 cm pH 4.0~7.0两种pH梯度IPG胶条对同一样品进行第一向等电聚焦,12%SDS-PAGE凝胶进行第二向电泳,银染后用PDQuest软件(V7.4)对电泳图谱进行分析.结果表明,在上述两种提取稻瘟菌胞外蛋白的方法中,TCA-DOC沉淀法具有较好的提取效果,应用该实验方法得到的蛋白质分布在pH 4.0~7.0之间的点数达到621个,因此在双向电泳中,采用pH 4.0~7.0的胶条具有较好的分辨率.
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关 键 词: | 稻瘟菌 胞外蛋白 提取 双向电泳 |
Study on Extracting and 2-D Electrophoresis of Extracellular Protein in Magnaporthe grisea |
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Abstract: | ![]()
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Keywords: | |
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