单增李斯特菌谷氧还蛋白调控氧化应激相关基因转录的研究 |
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引用本文: | 张念琦,孙静,宋厚辉,卫芳芳,陈绵绵,程昌勇.单增李斯特菌谷氧还蛋白调控氧化应激相关基因转录的研究[J].中国预防兽医学报,2023(5):459-465+501. |
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作者姓名: | 张念琦 孙静 宋厚辉 卫芳芳 陈绵绵 程昌勇 |
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作者单位: | 浙江农林大学动物科技学院/动物医学院/浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心/浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地/中澳动物健康大数据分析联合实验室 |
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基金项目: | 浙江省自然科学基金(LY19C180001、LZ19C180001、LQ20C180001);;国家自然科学基金(31972648、31872620、32172849、32002253); |
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摘 要: | 本实验室前期对单增李斯特菌(LM)谷氧还蛋白(Grx)转录组数据进行了分析,在此基础上为了对Grx调控细胞色素氧化酶等应激相关基因(lmo0722、qox A、qox B、gr)的转录及其作用机制研究,本研究将Δgrx与野生株EGD-e经4 mmol/L肼应激后,分别提取总RNA并反转录为cDNA作为模板,利用RT-q PCR检测Grx调控细胞色素氧化酶等应激相关基因转录情况,结果显示,Δgrx与野生株EGD-e相比,grx基因缺失引起qox B、qox A、gr、lmo0722等基因的转录水平显著上调(分别上调30、29、17和5.6倍)。利用李斯特菌穿梭质粒构建携带调控基因启动子序列的gfp报告质粒,电转化至野生株EGD-e和缺失株Δgrx感受态细胞中,获得含GFP的重组报告菌株。将这两种含GFP的重组报告菌液分别加入4 mmol/L肼后检测荧光强度,结果显示,EGD-e携带的GFP荧光数值显著低于缺失株Δgrx (P<0.01),进一步表明Grx参与调控上述应激相关基因的转录。将扩增的lmo0722、qox A、qox B和gr基因的启动子和Grx、Prf A和GAPDH重...
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关 键 词: | 单增李斯特菌 谷氧还蛋白 氧化应激相关基因 调控机制 环境适应 |
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