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重组产气荚膜梭菌α毒素对家兔的安全性和免疫效力评价
引用本文:赵晓军,王美玲,段跃强,谭美玲,石悦萌,陈千林,郭庆勇.重组产气荚膜梭菌α毒素对家兔的安全性和免疫效力评价[J].中国预防兽医学报,2023(4):429-433.
作者姓名:赵晓军  王美玲  段跃强  谭美玲  石悦萌  陈千林  郭庆勇
作者单位:1. 内蒙古伊利实业集团股份有限公司;2. 新疆农业大学动物医学学院;3. 内蒙古华希生物科技有限公司
摘    要:为探究重组产气荚膜梭菌α毒素对家兔的安全性和免疫保护效力,本研究构建了含产气荚膜梭菌α毒素基因的重组质粒p VL1393-CPA,并通过BD BaculoGold TM转染试剂盒转染Sf9细胞后,经噬斑纯化获得单克隆重组病毒,将其感染High 5细胞进行表达,表达的重组蛋白经SDS-PAGE和western blot检测,结果显示均获得了45 ku的目的蛋白,即为重组α毒素。将重组α毒素用0.1%甲醛溶液灭活脱毒后与ISA 206 VG佐剂乳化制备亚单位疫苗(抗原含量为20μg/m L),以40μg/只肌肉注射体质量1.5 kg~2.0 kg的家兔,同时设PBS对照组,注射后连续观察7 d,结果显示实验兔临床观察无异常,该疫苗对家兔的安全性良好。随后以20μg/只肌肉注射家兔,免疫21 d后以相同剂量加强免疫一次,同时设佐剂对照组和α毒素对照组,首免21 d、二免14 d时采血分离血清,采用ELISA方法检测免疫兔血清Ig G抗体效价,同时进行二免血清小鼠体内毒素中和试验以及家兔攻毒免疫保护试验,以评价该疫苗对家兔的免疫保护效力。结果显示,疫苗免疫组家兔血清Ig G抗体效价比佐剂对照组...

关 键 词:产气荚膜梭菌  α毒素  疫苗  中和效价  攻毒保护
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