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| 利用Red重组系统敲除APEC毒力岛irp2基因 | |
| 作者姓名： | 李叶芳 涂健 邵颖 刘红梅 祁克宗 |
| 作者单位： | 安徽农业大学动物科技学院,合肥,230036 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(30871851)资助 |
| 摘 要： | 应用质粒pKD46介导的Red同源重组系统,以质粒pKD3为模板,设计irp2基因序列敲除引物,引物5'端有51 bp的拟敲除基因的同源臂,3 '端为扩增引物,扩增两侧含FRT位点的氯霉素抗性基因,通过第1次同源重组将拟敲除的irp2基因替换为氯霉素抗性基因,再通过重组酶质粒pCP20在FRT位点发生第2次同源重组,消除抗性基因.结果表明,利用该重组系统成功敲除了禽致病性大肠杆菌HPI毒力岛irp2基因.为深入研究irp2基因在禽致病性大肠杆菌致病过程中所发挥的作用打下基础. |
| 关 键 词： | 禽致病性大肠杆菌 HPI毒力岛 Red同源重组酶 irp2 缺失 |
| 收稿时间： | 2012-04-09 |
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