用 Digoxigenin 标记核酸探针检测 EDS-76 病毒核酸的研究 |
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引用本文: | 孙刚,潘兴广,刘尚高.用 Digoxigenin 标记核酸探针检测 EDS-76 病毒核酸的研究[J].中国预防兽医学报,1998(1). |
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作者姓名: | 孙刚 潘兴广 刘尚高 |
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作者单位: | 黑龙江省兽医卫生防疫站,中国农业大学动物医学院 |
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摘 要: | 用EDS76病毒标准AV127株和分离株(B96株)感染鸭胚,提取病毒核酸,分别经EcoRl和Pstl双酶切,获得图形和大小相似的酶切片段。分别进行EcoRl和Pstl单酶切,也得到相似结果。病毒DNA经EcoRl和Pstl双酶切后,与PUC19质粒载体重组,并转化到EcoliJM101中,筛选出一个插入片段(G片段)约为27kb的重组质粒。用Digoxigemin标记EDS76DNAG片段(EcoRl和Pstl双酶切片段)及含该片段的重组质粒分别制备探针,对EDS76病毒DNA进行斑点杂交,两种探针均为阳性,而对照组NDV、IBV、ILTV、IBDV正常鸭胚尿囊液的核酸为阴性。且后一种探针的敏感性高于前者,它的DNA检出限量为4pg水平。结果表明,两种探针具有高度的特异性、敏感性。
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关 键 词: | 减蛋综合症 病毒 Digoxigenin 核酸探针 |
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