| 鳗源迟缓爱德华氏菌菌蜕的构建及制备条件优化 |
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| 作者姓名： | 李宁求 余露军 付小哲 刘礼辉 林强 常藕琴 石存斌 黄志斌 吴淑勤 |
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| 作者单位： | 中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业部渔药创制重点实验室;中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业部渔药创制重点实验室;中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业部渔药创制重点实验室;中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业部渔药创制重点实验室;中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业部渔药创制重点实验室;中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业部渔药创制重点实验室;中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业部渔药创制重点实验室;中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业部渔药创制重点实验室;中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业部渔药创制重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家科技支撑计划项目(2012BAD25B02); 国家自然科学基金项目(31202032); 广东省自然科学基金项目(7004728) |
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| 摘 要： | 菌蜕具有完整细菌表面抗原结构, 可诱导机体的体液和细胞免疫应答, 成为疫苗制备的候选之一,为了探讨鳗鲡迟缓爱德华氏菌菌蜕疫苗的可行性, 实验采用基因重组技术构建了噬菌体PhiX174裂解酶基因(Lysis E)的温控表达载体, 转化迟缓爱德华氏菌, 成功制备其菌蜕, 并对菌蜕形态、溶菌动力学、裂解效率以及制备条件等进行了研究。结果表明, 细菌菌蜕表面形成溶菌孔道, 细胞因内容物流失而发生明显的皱缩; 构建的迟缓爱德华氏菌诱导后1 h开始裂解, 5 h后裂解基本完成, 裂解效率为99.99%, 冷冻干燥后重悬涂布平板, 未检出活菌, 电镜观察表明冻干前后细胞形态未见明显变化; 构建的迟缓爱德华氏菌分别在OD600值为0.4和0.6进行诱导, 其裂解过程和裂解效率没有明显区别; 分别用LB、BHI、NB 3种培养基进行比较研究, 其中LB培养基制备的菌蜕细胞较完整、裂解完全, 是制备迟缓爱德华氏菌菌蜕最优培养基。本研究成功构建了鳗源迟缓爱德华氏菌菌蜕, 并对其制备条件进行了优化, 为鳗鲡爱德华氏菌病疫苗开发奠定了基础。
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| 关 键 词： | 鳗鲡 迟缓爱德华氏菌 菌蜕 条件优化 |
| 收稿时间： | 2012-03-31 |
| 修稿时间： | 2012-08-27 |
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