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水牛胚胎生殖干细胞饲养层体系的建立
引用本文:汪彩珠,杨素芳,罗婵,陈施蓓,石德顺. 水牛胚胎生殖干细胞饲养层体系的建立[J]. 中国兽医学报, 2012, 32(12)
作者姓名:汪彩珠  杨素芳  罗婵  陈施蓓  石德顺
作者单位:广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,广西南宁,530005
基金项目:基金项目:“863”动植物生物反应器新技术研究项目,水牛成纤维细胞转染外源基因的研究项目
摘    要:本试验对水牛胚胎生殖干细胞饲养层体系建立进行了研究。首先比较了组织块法和酶消化法培养水牛胎儿成纤维细胞的差异;其次探讨丝裂霉素处理水牛胎儿成纤维细胞的有效时间;最后以建立的饲养层体系培养水牛胚胎生殖干细胞。结果表明:(1)组织块法培养的细胞状态优于酶消化法,组织块培养法更适于水牛胎儿成纤维细胞的分离培养;(2)第三代的水牛胎儿成纤维细胞核型正常,状态良好,可用于饲养层的制备;(3)通过MTT和Brdu法检测,确定10mg/L的丝裂霉素C处理水牛胎儿成纤维细胞3.5h能有效抑制成纤维细胞增殖且细胞形态良好;(4)在本试验条件下制备的饲养层能有效维持水牛胚胎生殖千细胞至8代。

关 键 词:胚胎生殖干细胞  成纤维细胞  丝裂霉素C  饲养层

The establishement of feeder layer for buffalo EG-like cells
Abstract:
Keywords:embryonic germ stem cell,fibroblast  mitomycin C  feeder layer
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